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银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于96孔培养板培养酵母 已有8人参与

我想做用96孔板培养酵母做筛选用(培养体积1ML-2ML,不能向动物细胞那样只培养几百UL),以前实验室没有人做过,我也查了相关的东西,网上也有卖1ML或2ML培养板的。我只是想问一下,培养的时候96孔板培养板怎么震荡呀,我们实验室有200rpm大摇床,有没 有专门用于96孔板震荡的仪器呀,因为只是准备做,附近也没有人做,想求做过的人指点。还有培养结束后有文献说用离板机离心,这个离板机是不是就是普通的离心机换上那种可以离96孔板的转子呀,求指点!看文献上那么说的,因为没做过也没见过这些仪器,我们实验室有小离心机。看网上说有96孔离板机,是做PCr用的,不知道能不能离2ML的板子?求指点,好把东西准备齐了,开始实验!
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yixibiyu

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-24 22:53:16
我最近也在做,不过不建议用96孔板,96孔板的空体积比较小,一般摇500ul,而且酵母生长最好空气还是多点好,否则都发酵产生酒精。我用的是48孔板,对于酵母来说摇500ul-1ml都没什么问题,它的空体积很大,比96孔板好很多。我是加500ul培养的,摇起来比较容易,这样可以在普通的30度摇床里就可以培养了(如果里面没有专门给这种孔板的设置,可以用其他东西固定下),不过你说的200rpm肯定太低,酵母涨起来就会沉淀,建议250rpm或以上。至于离心的问题,我们实验室有BACMAN的离心机,里面有专门离这种孔板的转子,所以很方便。如果你们没有,也借不到,你就每个孔吸出来一个一个离吧,反正酵母很好离的,呵呵。以后可以多交流,我们实验室就我一个做酵母,一路跌跌撞撞碰了不少壁,以后可以多交流啊
5楼2010-05-24 21:03:13
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xinqing617

铜虫 (正式写手)


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沙发~~~~~
2楼2010-05-24 19:07:42
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xinqing617

铜虫 (正式写手)

我们实验室就有96孔板震荡的仪器,可以买一个!!!
3楼2010-05-24 19:08:33
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wgl365

银虫 (小有名气)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by xinqing617 at 2010-05-24 19:08:33:
我们实验室就有96孔板震荡的仪器,可以买一个!!!

我在网上查一下,呵呵!那个东西不贵吧
思想是行动的种子!
4楼2010-05-24 19:12:41
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wgl365

银虫 (小有名气)

恩,谢谢你

引用回帖:
Originally posted by yixibiyu at 2010-05-24 21:03:13:
我最近也在做,不过不建议用96孔板,96孔板的空体积比较小,一般摇500ul,而且酵母生长最好空气还是多点好,否则都发酵产生酒精。我用的是48孔板,对于酵母来说摇500ul-1ml都没什么问题,它的空体积很大,比96孔板 ...

恩,谢谢你的分享,我是准备做,所以要买一些东西!
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6楼2010-05-24 23:08:33
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nklyw

木虫 (正式写手)

有专门摇96孔板的,我们实验室就有啊
7楼2010-05-24 23:24:48
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姜大磊

木虫 (小有名气)


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引用回帖:
Originally posted by yixibiyu at 2010-05-24 21:03:13:
我最近也在做,不过不建议用96孔板,96孔板的空体积比较小,一般摇500ul,而且酵母生长最好空气还是多点好,否则都发酵产生酒精。我用的是48孔板,对于酵母来说摇500ul-1ml都没什么问题,它的空体积很大,比96孔板 ...

朋友您好!借助宝地一用。 我想请教一下细胞培养板的筛选原理是什么啊,加进培养基再加菌,还是直接加的就是菌液呢? 然后是怎么筛选的啊,请赐教。谢谢。
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
8楼2010-05-25 07:58:58
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yixibiyu

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不知楼上要筛选什么呢,这种孔板主要是用来进行高通量筛选的,比如随机突变等。孔板里加的是培养基,然后把单克隆或者把一级培养的菌接进去。
9楼2010-05-25 09:26:04
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wgl365

银虫 (小有名气)

是筛选突变体

引用回帖:
Originally posted by yixibiyu at 2010-05-25 09:26:04:
不知楼上要筛选什么呢,这种孔板主要是用来进行高通量筛选的,比如随机突变等。孔板里加的是培养基,然后把单克隆或者把一级培养的菌接进去。

做蛋白质工程呀
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10楼2010-05-25 11:47:51
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