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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮忙看一下，好奇怪，我的电泳图，三个加样孔在分离胶合在一起了
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮忙看一下，好奇怪，我的电泳图，三个加样孔在分离胶合在一起了

我是筛到一个菌，发酵产酶，硫酸铵沉淀，透析，DNS检测有活性，跑电泳，电泳图如下，由于不知道是什么酶，分子量大小，目前也没有查到这方面的文献，但电泳图很奇怪，跑了几次都这样帮忙看一下谢谢了。
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家有儿女888
1楼 2011-07-13 22:50:43
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励上图 2011-07-14 07:56:46
刚才图片没有传上去下面是电泳图
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家有儿女888
2楼2011-07-13 23:01:34
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2011加油

银虫 (正式写手)
确实好奇怪啊
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每天都是新开始，2011，要好好努力！
3楼2011-07-13 23:11:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-07-14 07:56:34
硫酸铵太多了，蛋白质会跑得很奇怪的。再说仅经过硫酸铵沉淀这一步的酶肯定也不纯的，不用跑胶，看不出大小的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-07-13 23:19:17
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)
那我应该怎么处理呢，我已经透析了3天，我没有关于这个酶的任何信息，只知道是多糖水解酶，目前来说此酶应该是胞外酶，胞内酶活性很低。
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家有儿女888
5楼2011-07-14 10:35:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
可以用其它纯化方法一起来
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-07-14 17:52:30
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xinxing481

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-15 18:56:57
同意二楼的看法，盐浓度过高，并且硫酸铵沉淀并不能很纯的分离蛋白，可以先测几个底物试试，看是什么酶活，然后再根据底物是否能跑个活性电泳！
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7楼2011-07-14 20:24:01
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hanxf0818

新虫 (初入文坛)
dhd997: 如果你想告诉谁，可以引用回复，这一可以给人一个提示， 2011-07-15 18:57:40
活性电泳我跑了，有活性，但也不是条带，一片，后来又把胶割下来，用缓冲液溶解，再跑电泳，还有活性，还是不是正常的条带，跟上面一样，也是弯曲的，染色也没有条带。
这酶活性因该挺高的，固体平板上接这个菌，划线，两天就全部变成液体了。
可是这个液体跑电泳，上样100微升，也没看到条带。培养基是多糖加无机盐。
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家有儿女888
8楼2011-07-15 11:35:49
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