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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 奇怪的质粒电泳图，求解。。
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yilanly

银虫 (初入文坛)

[求助] 奇怪的质粒电泳图，求解。。

两个图片的质粒对应空是一样的，顺序一样，但是跑出来相差很大，不知道是什么原因。另外我的质粒为什么会弥散呢？我用的是SYBRGREEN，第一张跑完后想着可能是跑的时间太长了，一个半小时，第二张不到一个小时就结束，但是好奇怪都是2kb多点的质粒，怎么位置不对呢，我的MARKER是普博的DL4000.
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1楼 2011-08-04 15:15:29
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
yilanly(金币+10): 谢谢你的回帖，我准备再试一次，换了地方做实验，光这个电泳就跑的我很头大 2011-08-04 16:09:05
dhd997(金币+2): good 2011-08-04 16:36:38
条带很奇怪，估计是琼脂糖没有溶解完全，连Marker都跑得很难看！
建议：1）降低电压；2）重新配胶试试！
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2楼2011-08-04 16:02:38
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): good 2011-08-09 07:19:11
胶跑成这样明显是胶的原因。另外即使是相同的质粒，从不同的克隆里面提取出来跑胶的带型也有可能是不一样的；mark只能标定线性DNA的大小，而无法标定质粒的大小。综上，给您的建议有：
1.重新配制制胶缓冲液，重新制胶
2.将质粒酶切后跑胶，跑胶的时候带质粒做对照
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3楼2011-08-05 11:20:13
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ytf149

新虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-09 07:19:22
两次不能下结论，再跑一次试试，把缓冲液也换掉，配新的胶，电压开小点，你电压开的有点大，因为marker条带都不够好
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加油~
4楼2011-08-08 23:26:37
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