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annsp

金虫 (正式写手)

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[交流] 牛人帮忙看看吧，很奇怪的质粒（pDG1730）电泳图已有3人参与

TG1中的质粒pDG170,7602bp。但是提出的质粒电泳图很奇怪，求解（Marker是DL 1000bp）？同时对提出的质粒进行了单酶切，用到从左往右依次是Marker DL 1000bp, 提出的质粒pDG1730，EcoRI 单切， BamHI单切。
是不是我质粒提的有问题呀，可是换了不同的人提了，结果也是一样。

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1楼 2011-07-12 15:29:07

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雨城雨

银虫 (小有名气)

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dhd997(金币+5, EPI+1): 专家鉴定正常。 2011-07-12 19:27:48

这是正常的，质粒在复制过程中有几种形式存在，培养时间如果不是在对数生长期，环状、开环和线性的会同时存在，因迁移率不同显示几条带。你单酶切完全后应该变成一条带。不同的菌种繁殖速度不同，注意培养时间以及相应的转速，

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2楼2011-07-12 15:51:23

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天使托

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T.Shen

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amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-12 21:01:25

一般情况下提取出来的质粒都是两条带的，底下比较亮的是超螺旋，上面稍微淡的是开环DNA，想看质粒大小的话就是进行酶切了，一般显示该质粒多大，指的是线性的大小；
但是我看楼主底下的图，marker右边的应该是你提取的质粒，理应比你两个单酶切的小吧？怎么感觉有点奇怪呢？

还有，质粒一般存在三种形式，在电泳中迁移率是不一样的，最快的是超螺旋，其次是线性的，最慢的是开环DNA。。。

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