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annsp

金虫 (正式写手)

[交流] 牛人帮忙看看吧,很奇怪的质粒(pDG1730)电泳图 已有3人参与

TG1中的质粒pDG170,7602bp。但是提出的质粒电泳图很奇怪,求解(Marker是DL 1000bp)?同时对提出的质粒进行了单酶切,用到从左往右依次是Marker DL 1000bp, 提出的质粒pDG1730,EcoRI 单切, BamHI单切。
是不是我质粒提的有问题呀,可是换了不同的人提了,结果也是一样。


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雨城雨

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+5, EPI+1): 专家鉴定正常。 2011-07-12 19:27:48
这是正常的,质粒在复制过程中有几种形式存在,培养时间如果不是在对数生长期,环状、开环和线性的会同时存在,因迁移率不同显示几条带。你单酶切完全后应该变成一条带。不同的菌种繁殖速度不同,注意培养时间以及相应的转速,
2楼2011-07-12 15:51:23
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-12 21:01:25
一般情况下提取出来的质粒都是两条带的,底下比较亮的是超螺旋,上面稍微淡的是开环DNA,想看质粒大小的话就是进行酶切了,一般显示该质粒多大,指的是线性的大小;
但是我看楼主底下的图,marker右边的应该是你提取的质粒,理应比你两个单酶切的小吧?怎么感觉有点奇怪呢?

还有,质粒一般存在三种形式,在电泳中迁移率是不一样的,最快的是超螺旋,其次是线性的,最慢的是开环DNA。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-07-12 20:08:25
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空谷幽风

金虫 (正式写手)


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mark最大的条带是多少,是1000bp吗?
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-12 23:16:03
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annsp

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-07-12 23:16:03:
mark最大的条带是多少,是1000bp吗?

是10000bp的
5楼2011-07-13 08:23:59
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