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yilanly

银虫 (初入文坛)

[求助] 奇怪的质粒电泳图,求解。。

两个图片的质粒对应空是一样的,顺序一样,但是跑出来相差很大,不知道是什么原因。另外我的质粒为什么会弥散呢?我用的是SYBRGREEN,第一张跑完后想着可能是跑的时间太长了,一个半小时,第二张不到一个小时就结束,但是好奇怪都是2kb多点的质粒,怎么位置不对呢,我的MARKER是普博的DL4000.


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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
yilanly(金币+10): 谢谢你的回帖,我准备再试一次,换了地方做实验,光这个电泳就跑的我很头大 2011-08-04 16:09:05
dhd997(金币+2): good 2011-08-04 16:36:38
条带很奇怪,估计是琼脂糖没有溶解完全,连Marker都跑得很难看!
建议:1)降低电压;2)重新配胶试试!
2楼2011-08-04 16:02:38
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): good 2011-08-09 07:19:11
胶跑成这样明显是胶的原因。另外即使是相同的质粒,从不同的克隆里面提取出来跑胶的带型也有可能是不一样的;mark只能标定线性DNA的大小,而无法标定质粒的大小。综上,给您的建议有:
1.重新配制制胶缓冲液,重新制胶
2.将质粒酶切后跑胶,跑胶的时候带质粒做对照
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-08-05 11:20:13
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ytf149

新虫 (小有名气)

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-09 07:19:22
两次不能下结论,再跑一次试试,把缓冲液也换掉,配新的胶,电压开小点,你电压开的有点大,因为marker条带都不够好
加油~
4楼2011-08-08 23:26:37
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