应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。
161/2返回列表12下一页
查看: 2458  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tongchuan

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。 已有8人参与

各位大家好，大家帮我看下下面的这张电泳图

用了有以前师兄做过的内参GAPDH，引物合成也一样。片段也就200多。条件什么的都一样，只是他做的是脑，我做的是肠管，我的一直是上面的结果，用的百分之1.5的TBE。师兄的图片做的很漂亮，还两对其它的基因，片段一个是400，一个是700。最好结果都是这样。
我提的RNA结果电泳很好，反转录一般也不会出什么问题吧，pCR按照师兄的条件也做不出来。
各位大哥大姐，帮忙分析下原因，定重谢。。。Sample TextSample TextSample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-02 15:23:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
=v=不明白你的问题在哪里
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-10-02 15:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwei1987

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-10-03 03:23:08
如果说前边都很好，很有可能就是反转的问题，建议跑个反转产物看看
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-10-02 15:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物二聚体好亮，引物和酶是不是加太多了？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-03 08:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上，marker都不知道是毛何以推断为dimer
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-03 09:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lhwei1987 at 2010-10-02 15:41:39:
如果说前边都很好，很有可能就是反转的问题，建议跑个反转产物看看

谢谢你的建议，我晚会做个CDNA电泳，看结果怎么样？
赞一下 回复此楼
6楼2010-10-03 13:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
做cDNA电泳？such a bad idea
跑出来就是一smear，有神马好判断好坏的
倘若cDNA浓度不高，分分钟跑出来神马都看不见
赞一下 回复此楼
7楼2010-10-03 23:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holylord

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):辛苦~ 2010-10-06 13:18:58
图片做的很糟糕，点样空都看不见，也不好判断。看你国庆还在发帖，呵呵，回复你。建议：
1、确定肠组织的RNA提取没有问题（电泳检测）
2、反转不要出错。
3、以别人论文（外文较佳）公布的内参引物和条件，用你的cdna跑pcr。
4、以你师兄的cdna为模板，内参GAPDH引物，跑pcr。
5、以你师兄的cdna为模板，你的引物跑pcr。
6、以你的引物和你的cdna模板跑pcr。
7、电泳，点样。顺序M33445566.
8、分析图片，你就会知道问题出在哪里了。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-10-03 23:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
模板不纯，引物过多等引起的
奇怪的是你的DNA都超过了Marker
赞一下(1人) 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
9楼2010-10-05 10:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by holylord at 2010-10-03 23:33:16:
图片做的很糟糕，点样空都看不见，也不好判断。看你国庆还在发帖，呵呵，回复你。建议：
1、确定肠组织的RNA提取没有问题（电泳检测）
2、反转不要出错。
3、以别人论文（外文较佳）公布的内参引物和条件，用你 ...

谢谢你给这么多建议，我用的就是好外文里的GAPDH引物。跑的rna电泳很好三条带，反转录只有三条带，和网上讨论的不太一样。我现在重新取材，怀疑是肠管里含的酶太多，MRNA降解了。
赞一下 回复此楼
10楼2010-10-05 12:28:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tongchuan 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[教师之家] 焦虑 +5 水冰月月野兔 2026-03-13 7/350 2026-03-14 15:14 by 农药害害
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 泣血叩求调剂恩，愿以丹心报师恩 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭