应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
161/2返回列表12下一页
查看: 2496  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tongchuan

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。 已有8人参与

各位大家好，大家帮我看下下面的这张电泳图

用了有以前师兄做过的内参GAPDH，引物合成也一样。片段也就200多。条件什么的都一样，只是他做的是脑，我做的是肠管，我的一直是上面的结果，用的百分之1.5的TBE。师兄的图片做的很漂亮，还两对其它的基因，片段一个是400，一个是700。最好结果都是这样。
我提的RNA结果电泳很好，反转录一般也不会出什么问题吧，pCR按照师兄的条件也做不出来。
各位大哥大姐，帮忙分析下原因，定重谢。。。Sample TextSample TextSample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-02 15:23:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
=v=不明白你的问题在哪里
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-10-02 15:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwei1987

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-10-03 03:23:08
如果说前边都很好，很有可能就是反转的问题，建议跑个反转产物看看
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-10-02 15:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物二聚体好亮，引物和酶是不是加太多了？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-03 08:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上，marker都不知道是毛何以推断为dimer
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-03 09:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lhwei1987 at 2010-10-02 15:41:39:
如果说前边都很好，很有可能就是反转的问题，建议跑个反转产物看看

谢谢你的建议，我晚会做个CDNA电泳，看结果怎么样？
赞一下 回复此楼
6楼2010-10-03 13:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
做cDNA电泳？such a bad idea
跑出来就是一smear，有神马好判断好坏的
倘若cDNA浓度不高，分分钟跑出来神马都看不见
赞一下 回复此楼
7楼2010-10-03 23:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holylord

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):辛苦~ 2010-10-06 13:18:58
图片做的很糟糕，点样空都看不见，也不好判断。看你国庆还在发帖，呵呵，回复你。建议：
1、确定肠组织的RNA提取没有问题（电泳检测）
2、反转不要出错。
3、以别人论文（外文较佳）公布的内参引物和条件，用你的cdna跑pcr。
4、以你师兄的cdna为模板，内参GAPDH引物，跑pcr。
5、以你师兄的cdna为模板，你的引物跑pcr。
6、以你的引物和你的cdna模板跑pcr。
7、电泳，点样。顺序M33445566.
8、分析图片，你就会知道问题出在哪里了。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-10-03 23:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
模板不纯，引物过多等引起的
奇怪的是你的DNA都超过了Marker
赞一下(1人) 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
9楼2010-10-05 10:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by holylord at 2010-10-03 23:33:16:
图片做的很糟糕，点样空都看不见，也不好判断。看你国庆还在发帖，呵呵，回复你。建议：
1、确定肠组织的RNA提取没有问题（电泳检测）
2、反转不要出错。
3、以别人论文（外文较佳）公布的内参引物和条件，用你 ...

谢谢你给这么多建议，我用的就是好外文里的GAPDH引物。跑的rna电泳很好三条带，反转录只有三条带，和网上讨论的不太一样。我现在重新取材，怀疑是肠管里含的酶太多，MRNA降解了。
赞一下 回复此楼
10楼2010-10-05 12:28:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tongchuan 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +6 Hll胡 2026-04-04 6/300 2026-04-05 09:24 by barlinike
[考研] 材料工程310专硕调剂 +13 捞捞我…. 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:01 by 来看流星雨10
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:57 by 544594351
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +11 努力奋斗112 2026-04-04 11/550 2026-04-04 20:51 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 085602 找调剂 +4 逆时针快乐 2026-04-02 4/200 2026-04-04 19:32 by 蓝云思雨
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 工科341分调剂 +3 洛多罗 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:20 by 1753564080
[考研] 专硕 351 086100 也是考的材科基 本科也是材料 +8 202451007219 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:50 by 蓝云思雨
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-02 11/550 2026-04-02 20:16 by yulian1987
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 120+4 Yishengeryi 2026-03-30 6/300 2026-04-02 17:19 by Yishengeryi
[考研] 348求调剂 +11 zzzzyk123 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:52 by Wang200018
[考研] 07生物学求调剂 一志愿同济大学359分 +3 LAMC. 2026-03-30 3/150 2026-04-02 10:26 by 18828373951
[考研] 一志愿厦门大学化学工程（专硕）-数二英二406分-求调剂 +5 厦大化工 2026-04-01 5/250 2026-04-02 10:03 by jp9609
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 5/250 2026-04-01 15:32 by 图鉴212
[考研] 326求调剂 +4 崽崽仔 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:58 by 我的船我的海
[考研] 0703化学321分求调剂 +10 三dd. 2026-03-30 11/550 2026-03-30 19:24 by markhwc
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭