应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。
161/2返回列表12下一页
查看: 2929  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tongchuan

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。 已有8人参与

各位大家好，大家帮我看下下面的这张电泳图

用了有以前师兄做过的内参GAPDH，引物合成也一样。片段也就200多。条件什么的都一样，只是他做的是脑，我做的是肠管，我的一直是上面的结果，用的百分之1.5的TBE。师兄的图片做的很漂亮，还两对其它的基因，片段一个是400，一个是700。最好结果都是这样。
我提的RNA结果电泳很好，反转录一般也不会出什么问题吧，pCR按照师兄的条件也做不出来。
各位大哥大姐，帮忙分析下原因，定重谢。。。Sample TextSample TextSample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-02 15:23:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
=v=不明白你的问题在哪里
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-10-02 15:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwei1987

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-10-03 03:23:08
如果说前边都很好，很有可能就是反转的问题，建议跑个反转产物看看
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-10-02 15:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物二聚体好亮，引物和酶是不是加太多了？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-03 08:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上，marker都不知道是毛何以推断为dimer
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-03 09:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lhwei1987 at 2010-10-02 15:41:39:
如果说前边都很好，很有可能就是反转的问题，建议跑个反转产物看看

谢谢你的建议，我晚会做个CDNA电泳，看结果怎么样？
赞一下 回复此楼
6楼2010-10-03 13:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
做cDNA电泳？such a bad idea
跑出来就是一smear，有神马好判断好坏的
倘若cDNA浓度不高，分分钟跑出来神马都看不见
赞一下 回复此楼
7楼2010-10-03 23:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holylord

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):辛苦~ 2010-10-06 13:18:58
图片做的很糟糕，点样空都看不见，也不好判断。看你国庆还在发帖，呵呵，回复你。建议：
1、确定肠组织的RNA提取没有问题（电泳检测）
2、反转不要出错。
3、以别人论文（外文较佳）公布的内参引物和条件，用你的cdna跑pcr。
4、以你师兄的cdna为模板，内参GAPDH引物，跑pcr。
5、以你师兄的cdna为模板，你的引物跑pcr。
6、以你的引物和你的cdna模板跑pcr。
7、电泳，点样。顺序M33445566.
8、分析图片，你就会知道问题出在哪里了。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-10-03 23:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
模板不纯，引物过多等引起的
奇怪的是你的DNA都超过了Marker
赞一下(1人) 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
9楼2010-10-05 10:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by holylord at 2010-10-03 23:33:16:
图片做的很糟糕，点样空都看不见，也不好判断。看你国庆还在发帖，呵呵，回复你。建议：
1、确定肠组织的RNA提取没有问题（电泳检测）
2、反转不要出错。
3、以别人论文（外文较佳）公布的内参引物和条件，用你 ...

谢谢你给这么多建议，我用的就是好外文里的GAPDH引物。跑的rna电泳很好三条带，反转录只有三条带，和网上讨论的不太一样。我现在重新取材，怀疑是肠管里含的酶太多，MRNA降解了。
赞一下 回复此楼
10楼2010-10-05 12:28:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tongchuan 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 25/1250 2026-08-16 10:53 by hmhminy
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 70/3500 2026-08-16 08:29 by 医学老男孩
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭