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weiyasong木虫 (著名写手)
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大家好,帮忙看看PCR结果吧?谢谢!!!
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大家好,昨天跑的PCR结果: 1、第3条带大约是多少啊? 2、第4条带的目的片段是187bp,有目的条带,但不是太清楚,而且引物很亮,这是怎么回事啊?PCR反应程序是94℃4min,94℃30s-56℃45s-72℃30s---30个循环,72℃5min 还请高人指教,小弟将不胜感激!谢谢!!! 112.jpg |
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weiyasong
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对于问题一:建议参照marker条带位置(看一下marker的说明书,应该会有对应的每条带长度说明的),以及你设计时候的预期扩增片段长度,结合起来可以估计出第三条带的大小。 对于问题二:应该是你扩增的条件设置不够理想,导致引物二聚体严重。建议提高退火问题,或者是用touchdown(二阶段温度法)的方法(对于上下游引物TM值相差较大的情况)重新扩增,扩增结果应该会有改善。 |
4楼2012-09-10 22:02:33
weiyasong
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