应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！
41/1返回列表
查看: 1923  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yzhlasiI

铁虫 (正式写手)

[交流] 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！

荧光定量PCR标准品的问题
我自己用质粒做的标准品，可是做了几次PCR CT值都有变化怎么办，还有标准品在4度好，还是-20好，如果4度能保存多长时间
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-12-14 12:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skywalkerelf

银虫 (小有名气)
★
yzhlasiI(金币+1):谢谢参与
短期4度，长期-20度，4度1周吧！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-12-16 11:33:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzhlasiI

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by skywalkerelf at 2011-12-16 11:33:45:
短期4度，长期-20度，4度1周吧！

做标准品的时候，两个质粒都测OD值了，因为我最后要计算同一样本两个基因的值的比，如果二者扩增效率不一致，怎么进行计算啊。我现在做的其中一个基因在10 8 copies/ul的时候CT值在8左右，斜率是2.9-3左右，而另一基因同等浓度的时候CT值在10左右，斜率是3.3-3.5，已经做过两次了，都是这样，这是什么原因呢？
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-20 11:14:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1.CT值变化的具体值差别有多大，是同次实验中平行管间的差别大还是不同次实验的数据差别大？
CT值肯定是在一个范围内波动的，基于PCR的定量的先天不足，没办法保证每次实验的添加的比例完全一致。
质粒的话啊，4度1个月无压力，尽快做吧，反复冻融对质粒其实影响也不大，但最好不要反复冻融。微观的东西不好说。
2.扩增效率不一样可以用各机器配套的软件进行矫正，AB的机子就有这个功能，实在不行应该也能去找原始文献，以前看过的，现在忘了。我比较倾向用仪器自带的，比较方便。

祝顺利
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-12-20 14:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yzhlasiI 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭