24小时热门版块排行榜    

查看: 1831  |  回复: 3

yzhlasiI

铁虫 (正式写手)


[交流] 做了几次PCR CT值都有变化怎么办?谢谢大家!!

荧光定量PCR标准品的问题
我自己用质粒做的标准品,可是做了几次PCR CT值都有变化怎么办,还有标准品在4度好,还是-20好,如果4度能保存多长时间
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skywalkerelf

银虫 (小有名气)



yzhlasiI(金币+1):谢谢参与
短期4度,长期-20度,4度1周吧!
2楼2011-12-16 11:33:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzhlasiI

铁虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by skywalkerelf at 2011-12-16 11:33:45:
短期4度,长期-20度,4度1周吧!

做标准品的时候,两个质粒都测OD值了,因为我最后要计算同一样本两个基因的值的比,如果二者扩增效率不一致,怎么进行计算啊。我现在做的其中一个基因在10 8 copies/ul的时候CT值在8左右,斜率是2.9-3左右,而另一基因同等浓度的时候CT值在10左右,斜率是3.3-3.5,已经做过两次了,都是这样,这是什么原因呢?
3楼2011-12-20 11:14:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1.CT值变化的具体值差别有多大,是同次实验中平行管间的差别大还是不同次实验的数据差别大?
CT值肯定是在一个范围内波动的,基于PCR的定量的先天不足,没办法保证每次实验的添加的比例完全一致。
质粒的话啊,4度1个月无压力,尽快做吧,反复冻融对质粒其实影响也不大,但最好不要反复冻融。微观的东西不好说。
2.扩增效率不一样可以用各机器配套的软件进行矫正,AB的机子就有这个功能,实在不行应该也能去找原始文献,以前看过的,现在忘了。我比较倾向用仪器自带的,比较方便。

祝顺利
4楼2011-12-20 14:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yzhlasiI 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 中科院材料273求调剂 +3 yzydy 2026-03-15 3/150 2026-03-15 21:15 by ms629
[考研] 化学工程321分求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:49 by a不易
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +3 Liwangman 2026-03-15 3/150 2026-03-15 18:16 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 大米饭! 2026-03-15 3/150 2026-03-15 17:48 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +4 yansheng@211 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:10 by JourneyLucky
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 304求调剂(085602一志愿985) +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +8 mingmingry 2026-03-09 9/450 2026-03-11 10:23 by 沙漠之狐994
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
请填处理意见