24小时热门版块排行榜    

查看: 3083  |  回复: 15

tongchuan

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图,急!做了7.8次还是这样。 已有8人参与

各位大家好,大家帮我看下下面的这张电泳图

用了有以前师兄做过的内参GAPDH,引物合成也一样。片段也就200多。条件什么的都一样,只是他做的是脑,我做的是肠管,我的一直是上面的结果,用的百分之1.5的TBE。师兄的图片做的很漂亮,还两对其它的基因,片段一个是400,一个是700。最好结果都是这样。
我提的RNA结果电泳很好,反转录一般也不会出什么问题吧,pCR按照师兄的条件也做不出来。
各位大哥大姐,帮忙分析下原因,定重谢。。。Sample TextSample TextSample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
=v=不明白你的问题在哪里
2楼2010-10-02 15:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwei1987

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-10-03 03:23:08
如果说前边都很好,很有可能就是反转的问题,建议跑个反转产物看看
3楼2010-10-02 15:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇

金虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物二聚体好亮,引物和酶是不是加太多了?
4楼2010-10-03 08:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼上,marker都不知道是毛何以推断为dimer
5楼2010-10-03 09:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by lhwei1987 at 2010-10-02 15:41:39:
如果说前边都很好,很有可能就是反转的问题,建议跑个反转产物看看

谢谢你的建议,我晚会做个CDNA电泳,看结果怎么样?
6楼2010-10-03 13:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

做cDNA电泳?such a bad idea
跑出来就是一smear,有神马好判断好坏的
倘若cDNA浓度不高,分分钟跑出来神马都看不见
7楼2010-10-03 23:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holylord

银虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):辛苦~ 2010-10-06 13:18:58
图片做的很糟糕,点样空都看不见,也不好判断。看你国庆还在发帖,呵呵,回复你。建议:
1、确定肠组织的RNA提取没有问题(电泳检测)
2、反转不要出错。
3、以别人论文(外文较佳)公布的内参引物和条件,用你的cdna跑pcr。
4、以你师兄的cdna为模板,内参GAPDH引物,跑pcr。
5、以你师兄的cdna为模板,你的引物跑pcr。
6、以你的引物和你的cdna模板跑pcr。
7、电泳,点样。顺序M33445566.
8、分析图片,你就会知道问题出在哪里了。
8楼2010-10-03 23:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
模板不纯,引物过多等引起的
奇怪的是你的DNA都超过了Marker
倚楼听风雨,淡看江湖路!
9楼2010-10-05 10:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongchuan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by holylord at 2010-10-03 23:33:16:
图片做的很糟糕,点样空都看不见,也不好判断。看你国庆还在发帖,呵呵,回复你。建议:
1、确定肠组织的RNA提取没有问题(电泳检测)
2、反转不要出错。
3、以别人论文(外文较佳)公布的内参引物和条件,用你 ...

谢谢你给这么多建议,我用的就是好外文里的GAPDH引物。跑的rna电泳很好三条带,反转录只有三条带,和网上讨论的不太一样。我现在重新取材,怀疑是肠管里含的酶太多,MRNA降解了。
10楼2010-10-05 12:28:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tongchuan 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 师弟论文见刊大半年才想起来申请专利,还能抢救一下吗? +5 13108017953 2026-09-21 5/250 2026-09-27 16:46 by Leogzhya
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +3 zju2000 2026-09-26 3/150 2026-09-27 16:26 by lala1008
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:26 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:15 by 4IW0sJvtEqX8
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:03 by 4IW0sJvtEqX8
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 oeyPlfmMUpOC 2026-09-26 3/150 2026-09-27 09:13 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:42 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:39 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:32 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:08 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:05 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:50 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 6/300 2026-09-27 05:42 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 5/250 2026-09-25 11:19 by yhq9807
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 7/350 2026-09-25 11:18 by yhq9807
信息提示
请填处理意见