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【求助/交流】PCR Mix如何选择？急~~ 已有4人参与
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我做一般的PCR实验，我看到有如下：2×Power Pfu PCR MasterMix，2×Power Taq Plus PCR MasterMix，2×Power LA PCR MasterMix，2×HotStart Taq PCR MasterMix，2×Power Taq PCR MasterMix 不知该如何选择？请高手指教  |
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2楼2011-03-10 18:13:27
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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我做一般的PCR实验，我看到有如下：2×Power Pfu PCR MasterMix，2×Power Taq Plus PCR MasterMix，2×Power LA PCR MasterMix，2×HotStart Taq PCR MasterMix，2×Power Taq PCR MasterMix 我分别对你的这几个酶就我的所知道的说一说， 2×Power Pfu PCR MasterMix 这个是个高保真的酶，应该比较贵，而且克隆的产物是不加A尾的，不能用来做TA克隆，如果你的PCR目的是为了获得基因然后做克隆，可以选择，因为保真性高，应该是酶里面的贵的了。 2×Power Taq Plus PCR MasterMix 这个不大清楚 2×Power LA PCR MasterMix 这个是专门用来P长片段的，大于3K甚至8K都可以，说明书说能P到几W，但是我没搞过，暂时表示怀疑。普通的长度也可以来P。可能保真性差一点，特异性也差一点，因为要P很长。 2×HotStart Taq PCR MasterMix 2×Power Taq PCR MasterMix 这俩一起说，这就是最普通的，也就是我们常说的Taq酶，一般PCR可用，但是上面那款是HOTSTART的，就是酶与抗体结合了，在常温下，酶是没有活性的，只有达到94度以后，抗体失活，酶才开始表现出活性，叫做热启动酶，可以减少非特异性或者其他什么的，但是贵些。 不知道楼主的PCR是用来干嘛，做克隆还是鉴定，模板是DNA 还是cDNA，还是质粒？如果是做鉴定，应该2×Power Taq PCR MasterMix 这个就OK了，比较便宜，用起来也可以满足需求。 以上是个人的认识，有说的不对的地方，还请高手指正。 |
4楼2011-03-10 19:57:33
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