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沾欢欢

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[求助] PCR DNA聚合酶的选择

我做普通PCR, 模板小于500bp,选用哪种酶比较好?
有没有哪种聚合酶是专门针对短片段模板的?

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1楼 2012-03-12 09:34:31

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whb21

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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沾欢欢(金币+3): ★★★很有帮助 2012-03-12 09:52:46

普通的Taq就可以的，如果做蛋白表达载体构建可以使用Pfu

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2楼2012-03-12 09:47:59

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dorecnu

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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沾欢欢(金币+4): ★★★很有帮助 2012-03-12 13:24:48
小丹木木(金币+3): 鼓励应助 2012-03-13 09:58:49

1.首先建议TAKARA PYROBEST DNA STAR等 100次 400元左右
2.有钱可考虑NEB PHUSION 该酶反应速度快，保真性很高。（比PFU高5-6倍），但是用来P 500bp左右的条带有点大材小用的感觉。100次 800元左右
3.当然，500bp条带出现错配的可能性本身不高，所以可使用博迈德等国产公司的TAQ MIX产品，使用非常方便。
4.感觉你会是以PCR产物作为模板，那成功与否和你500bp的模板好像没有太大关系，多考虑下引物设计吧。

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3楼2012-03-12 12:14:06

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