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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦


[求助] PCR DNA聚合酶的选择

我做普通PCR, 模板小于500bp,选用哪种酶比较好?
有没有哪种聚合酶是专门针对短片段模板的?
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whb21

木虫 (著名写手)

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★ ★ ★
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沾欢欢(金币+3): ★★★很有帮助 2012-03-12 09:52:46
普通的Taq就可以的,如果做蛋白表达载体构建可以使用Pfu
2楼2012-03-12 09:47:59
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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沾欢欢(金币+4): ★★★很有帮助 2012-03-12 13:24:48
小丹木木(金币+3): 鼓励应助 2012-03-13 09:58:49
1.首先建议TAKARA PYROBEST  DNA STAR等 100次 400元左右
2.有钱可考虑NEB PHUSION 该酶反应速度快,保真性很高。(比PFU高5-6倍),但是用来P 500bp左右的条带有点大材小用的感觉。100次 800元左右
3.当然,500bp条带出现错配的可能性本身不高,所以可使用博迈德等国产公司的TAQ MIX产品,使用非常方便。
4.感觉你会是以PCR产物作为模板,那成功与否和你500bp的模板好像没有太大关系,多考虑下引物设计吧。
3楼2012-03-12 12:14:06
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

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★ ★
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小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-13 09:59:10
我用的是全式金PCR super mix  在做的时候只需要 加水 引物 底物就行
做的效果也不错   一只打折后144   多买可能会便宜点。现在PCR酶很多,价格不等,你试一下吧。
快乐奋斗,创造所有。
4楼2012-03-12 20:05:04
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catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

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沾欢欢: 金币+1, 有帮助 2012-03-21 09:18:10
taq plus兼容taq酶和pfu的优点

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
5楼2012-03-15 00:41:57
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zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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沾欢欢: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-21 09:18:15
普通的TAKARA的rTag酶就可以,用primer star酶是高保真的,看你有没有特殊要求,一般500bp用这两个就可以了。
6楼2012-03-21 08:50:48
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-03-30 14:58:58
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