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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR DNA聚合酶的选择
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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦

[求助] PCR DNA聚合酶的选择

我做普通PCR, 模板小于500bp,选用哪种酶比较好?
有没有哪种聚合酶是专门针对短片段模板的?
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1楼 2012-03-12 09:34:31
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
沾欢欢(金币+3): ★★★很有帮助 2012-03-12 09:52:46
普通的Taq就可以的，如果做蛋白表达载体构建可以使用Pfu
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2楼2012-03-12 09:47:59
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
沾欢欢(金币+4): ★★★很有帮助 2012-03-12 13:24:48
小丹木木(金币+3): 鼓励应助 2012-03-13 09:58:49
1.首先建议TAKARA PYROBEST  DNA STAR等 100次 400元左右
2.有钱可考虑NEB PHUSION 该酶反应速度快，保真性很高。（比PFU高5-6倍），但是用来P 500bp左右的条带有点大材小用的感觉。100次 800元左右
3.当然，500bp条带出现错配的可能性本身不高，所以可使用博迈德等国产公司的TAQ MIX产品，使用非常方便。
4.感觉你会是以PCR产物作为模板，那成功与否和你500bp的模板好像没有太大关系，多考虑下引物设计吧。
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3楼2012-03-12 12:14:06
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-13 09:59:10
我用的是全式金PCR super mix  在做的时候只需要 加水 引物 底物就行
做的效果也不错   一只打折后144   多买可能会便宜点。现在PCR酶很多，价格不等，你试一下吧。
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快乐奋斗，创造所有。
4楼2012-03-12 20:05:04
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catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

【答案】应助回帖

★
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沾欢欢: 金币+1, ★有帮助 2012-03-21 09:18:10
taq plus兼容taq酶和pfu的优点

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
5楼2012-03-15 00:41:57
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zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
沾欢欢: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-21 09:18:15
普通的TAKARA的rTag酶就可以，用primer star酶是高保真的，看你有没有特殊要求，一般500bp用这两个就可以了。
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6楼2012-03-21 08:50:48
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
http://www.detaibio.com/dna-taq-polymerase.html
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-03-30 14:58:58
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