24小时热门版块排行榜    

查看: 2744  |  回复: 12

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
天yi: 金币+2 2012-05-09 19:44:35
可能同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增。
其对策有:①必要时重新设计引物。②减低酶量或调换另一来源的酶。③降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。
11楼2012-05-08 23:18:50
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 329181203lin at 2012-05-08 21:14:21:
胶浓度是指?

比如你本来是1%的琼脂糖胶,可以适当加大到1.2%或1.5%
12楼2012-05-09 22:02:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moshangchenx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

样品不纯,胶的浓度也有问题,引物设计的也不好
科研无止境,我心成蹉跎
13楼2012-12-25 20:23:54
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天yi 的主题更新
信息提示
请填处理意见