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天yi

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR电泳图怎么会这样?各位帮忙分析一下吧

PCR电泳图怎么会这样?各位帮忙分析一下吧,多谢了!
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A406

新虫 (初入文坛)

个人觉得首先你要确定你的实验目的,不同目的实验要求也不同,其次确认模板是否符合你的PCR,鉴定的话模板纯度不够也可以,只要能有一定亮度的PCR条带,第三,明确你的目的条带电泳是在什么位置,PCR程序是否正确,引物是否有问题(做个阳性对照),二聚体是会影响条带亮度,但要是如果实验没有很高要求,比如鉴定,存在二聚体也没关系。
如果想通过PCR获得目的基因,那就在目的基因上下取二十多碱基作为引物(不用软件设计),只要电泳条带无杂带,大小合适,测序结果正常就OK,不行就换对引物呗,或者刚开始多合成几对引物,现在合成引物及测序也很便宜很快。
6楼2011-12-06 12:56:39
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

天yi(金币+1): 2011-12-06 08:08:38
DNA 模板可能纯度不够,杂质干扰。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-12-06 01:00:30
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籽沐

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

天yi(金币+1): 2011-12-06 12:28:51
用不含DNA酶的RNA酶处理一下,后面拖尾的亮的可能是RNA
3楼2011-12-06 09:26:17
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
4楼2011-12-06 09:29:00
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