| 查看: 3919 | 回复: 27 | ||
[求助]
双酶切怎么操作才能完全彻底呢！ 已有7人参与
|
|
我现在正在做双酶切连接，用的是NcoI和PstI这两个酶，首先我是将连有目的基因的质粒进行双酶切，然后将新的片段经双酶切之后连入目的载体（新片段和原来质粒上的片段大小一样，片段1.5kb，质粒剩下部分为6.8kb）转化有转化子，菌落PCR验证正确，但是拿了8个转化子提质粒测序之后发现全是之前的那个旧质粒，现在怀疑是质粒双酶切没有切完全，请问我应该怎么操作才能尽可能保证酶切完全呢 已经纠结了很长时间了，求大神指点 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有109人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助！双酶切验证总切出来四条带，请亲们帮忙看看，非常着急啊！谢谢大家了！
已经有32人回复
- 双酶切总是切不开。。。有没有人用过NEB的NotI这个酶？
已经有36人回复
- fermentas双酶切体系
已经有5人回复
- 双酶切之后怎么知道切开了呢？
已经有10人回复
- 请问有人用双酶切过petduet-1载体吗？用bamHI和Hind3 双酶切
已经有5人回复
- 双酶切问题，跪求指导啊
已经有5人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 关于双酶切作用时间
已经有10人回复
- 求助--双酶切连接构质粒
已经有15人回复
- 双酶切体系构建 新手！
已经有3人回复
- pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。
已经有23人回复
- Xho1和EcoR1双酶切，切不开
已经有14人回复
- 双酶切没有切开，怎么回事啊
已经有6人回复
- 双酶切后目的条带的疑问？
已经有8人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 双酶切连TA后切不开
已经有13人回复
- 双酶切看不到小片段，为什么？
已经有19人回复
- 【求助/交流】关于双酶切
已经有6人回复
- 【求助/交流】双酶切载体总是切不完全
已经有11人回复
- 求双酶切，分步酶切的具体操作步骤
已经有7人回复
2楼2015-03-09 10:26:32
3楼2015-03-09 11:22:47
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2015-03-09 16:52:16
5楼2015-03-09 20:53:13
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2015-03-10 00:43:41
7楼2015-03-10 10:06:35
8楼2015-03-10 11:32:34
9楼2015-03-10 11:34:39
10楼2015-03-10 12:50:49
