24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2959  |  回复: 24
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Lotus617

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!已有10人参与

为什么我的AgeI酶切pLKO,1质粒载体每次切出来都是这个样子啊,求大侠们指点指点,严重影响实验进展了啊

  A=AgeI  E=EcoRI  AE=AgeI/EcoRI  78=pLKO.1质粒。菜鸟新手上路,求高手们赐教啊!


还有第三张是我用试剂盒提的质粒,0.8%跑胶成这个样子。不知提的纯不纯啊?、?

要shi的赶脚都有了!切了一个月了!

求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!
酶切1.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-1
酶切2.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-2
试剂盒提取的质粒


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-3
载体酶切20140409 上午.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-4
第三次提取质粒酶切  1  2014-04-23 13hr 41min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-05-12 15:21:32
LZ用的内切酶是快切酶还是普通酶啊,快切酶10分钟就切好了,如果切5分钟就能把质粒切碎那酶就不能用,换其他公司的吧,有些内切酶要添加BSA,你看看说明书上有没有说明,从图上看第二张图的78E好像切的还可以。
大家相互帮助哈
8楼2014-05-12 14:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by Lotus617 at 2014-05-12 21:55:13
今天我又把之前提的质粒拿来跑了一次,1%gel.有人说还可以,我也不确定到底可用不可用!请你们帮我看看!

未酶切质粒A 1  2014-05-12 11hr 56min_2345看图王.jpg

未酶切质粒B 1  2014-05-12 11hr 56min_2345看图王 ...

这次的质粒没有问题,可以切一次看看
大家相互帮助哈
13楼2014-05-12 22:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-12 22:58:36
引用回帖:
11楼: Originally posted by Lotus617 at 2014-05-12 21:57:09
用的neb的酶,自带有buffer1.1,不用加BSA。
另外我买了buffer1需加BSA,酶切结果一样。都碎了...

NEB的酶我用过,完全没有问题,除非分销商做了手脚
LZ可以37度用buffer1.1切割2个小时看看,如果还是碎就25度buffer1.1切割12个小时,我以前用过的NEB的pmeI  25度切16个小时,效果很好,不用担心star活性。
大家相互帮助哈
14楼2014-05-12 22:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Lotus617 的主题更新
信息提示
请填处理意见