应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒酶切后消失了
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 2845  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒酶切后消失了

最近把目的基因连到了pPIC9K质粒上，要转化毕赤酵母，转化之前用SalI酶切线性化，电泳检测重组质粒没有问题，但是空质粒酶切后就什么片段都没有了，没有酶切的空质粒电泳后是有条带的，请教各位高手这会是什么原因呢？我已经做了3遍了，每次都一样。图上左起一次是没有酶切的重组质粒、酶切后的重组质粒、marker、酶切后的空质粒、没有酶切的空质粒。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-06-30 18:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yandz680717

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-01 21:30:00
bigplantgirl(金币+1): 2011-07-06 19:02:33
空载体提取时，用酚-氯仿抽提没有？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-06-30 18:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yandz680717 at 2011-06-30 18:58:13:
空载体提取时，用酚-氯仿抽提没有？

我是用试剂盒提取的，没有用酚-氯仿抽提，和这个有关吗？
赞一下 回复此楼
3楼2011-06-30 20:54:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hooroberts

新虫 (小有名气)
酶切了多久，可能切过了
赞一下 回复此楼
4楼2011-06-30 21:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ty1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-01 21:30:14
bigplantgirl(金币+1): 2011-07-11 19:33:50
可能切久了会降解，请问酶切体系与时间啊？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-06-30 21:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ty1987 at 2011-06-30 21:19:44:
可能切久了会降解，请问酶切体系与时间啊？

50ul体系，其中质粒30ul，SalI 2ul，37℃酶切3h。重组质粒是用同样的条件切的，重组质粒就没降解。
赞一下 回复此楼
6楼2011-06-30 21:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ty1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-07-01 01:55:24
bigplantgirl(金币+1): 2011-07-06 19:02:02
引用回帖:
Originally posted by bigplantgirl at 2011-06-30 21:58:59:
50ul体系，其中质粒30ul，SalI 2ul，37℃酶切3h。重组质粒是用同样的条件切的，重组质粒就没降解。

那体系跟时间都没什么问题啊，那真是奇怪啊，怎么会没呢？跑电泳图的空载和酶切的空载是同一批提的吗？进行酶切的那个质粒没问题吧！
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-06-30 22:54:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-01 01:55:40
应该是质粒提取的有问题，酶切后会降解了
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-07-01 00:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ty1987 at 2011-06-30 22:54:42:
那体系跟时间都没什么问题啊，那真是奇怪啊，怎么会没呢？跑电泳图的空载和酶切的空载是同一批提的吗？进行酶切的那个质粒没问题吧！

是同一批提的，我今天做了这个空质粒的双酶切，跑电泳也没有条带，一定是质粒降解了，但是我又找不到原因，其他质粒都没事的。
赞一下 回复此楼
9楼2011-07-01 21:05:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuifen1108

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

bigplantgirl(金币+1): 2011-07-06 19:01:28
内容已删除
赞一下 回复此楼
10楼2011-07-02 15:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bigplantgirl 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703调剂 +9 拾玖壹 2026-04-04 10/500 2026-04-04 22:53 by 理想在实践之中
[考研] 358求调剂 +5 秋gk 2026-04-04 5/250 2026-04-04 21:03 by dongzh2009
[考研] 340求调剂 +4 jhx777 2026-03-29 4/200 2026-04-04 20:08 by 无际的草原
[考研] 309分085801求调剂 +11 MY_angel 2026-03-31 11/550 2026-04-04 19:11 by 蓝云思雨
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 求调剂，一志愿南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-04-03 10/500 2026-04-04 09:01 by T可可西里T
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 303求调剂 +10 DLkz1314. 2026-03-30 10/500 2026-04-03 18:03 by Jimmyandyou
[考研] 工科 267求调剂 +5 wanwan00 2026-04-02 7/350 2026-04-03 14:14 by zhangdingwa
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
[考研] 08工科275分求调剂 +14 AaAa7420 2026-03-31 14/700 2026-04-03 11:13 by cocolv
[考研] 085602化工求调剂（331分） +9 111@127 2026-03-30 9/450 2026-04-02 20:00 by dick_runner
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 本科211总分289，08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭