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Lotus617

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!已有10人参与

为什么我的AgeI酶切pLKO,1质粒载体每次切出来都是这个样子啊,求大侠们指点指点,严重影响实验进展了啊

  A=AgeI  E=EcoRI  AE=AgeI/EcoRI  78=pLKO.1质粒。菜鸟新手上路,求高手们赐教啊!


还有第三张是我用试剂盒提的质粒,0.8%跑胶成这个样子。不知提的纯不纯啊?、?

要shi的赶脚都有了!切了一个月了!

求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!
酶切1.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-1
酶切2.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-2
试剂盒提取的质粒


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-3
载体酶切20140409 上午.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-4
第三次提取质粒酶切  1  2014-04-23 13hr 41min.jpg
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luwei13566

木虫 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-12 22:58:36
引用回帖:
11楼: Originally posted by Lotus617 at 2014-05-12 21:57:09
用的neb的酶,自带有buffer1.1,不用加BSA。
另外我买了buffer1需加BSA,酶切结果一样。都碎了...

NEB的酶我用过,完全没有问题,除非分销商做了手脚
LZ可以37度用buffer1.1切割2个小时看看,如果还是碎就25度buffer1.1切割12个小时,我以前用过的NEB的pmeI  25度切16个小时,效果很好,不用担心star活性。
大家相互帮助哈
14楼2014-05-12 22:31:08
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-05-12 09:31:17
不纯是肯定的了,换换试剂盒吧,要不自己配制

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
2楼2014-05-12 06:44:11
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快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-05-25 23:03:29
切的时间太长了,切碎了
3楼2014-05-12 10:10:26
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Lotus617

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-12 06:44:11
不纯是肯定的了,换换试剂盒吧,要不自己配制

谢谢你的回复,我用的天根的质粒小提中量试剂盒,唉!怎么那么多条带?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-05-12 11:14:35
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