24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3109  |  回复: 24

Lotus617

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!! 已有10人参与

为什么我的AgeI酶切pLKO,1质粒载体每次切出来都是这个样子啊,求大侠们指点指点,严重影响实验进展了啊

  A=AgeI  E=EcoRI  AE=AgeI/EcoRI  78=pLKO.1质粒。菜鸟新手上路,求高手们赐教啊!


还有第三张是我用试剂盒提的质粒,0.8%跑胶成这个样子。不知提的纯不纯啊?、?

要shi的赶脚都有了!切了一个月了!

求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!
酶切1.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-1
酶切2.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-2
试剂盒提取的质粒


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-3
载体酶切20140409 上午.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-4
第三次提取质粒酶切  1  2014-04-23 13hr 41min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Lotus617

新虫 (初入文坛)

今天用NEB重新给我寄的AgeI酶来切我的质粒,终于见好了!果然是酶的问题!崩溃
23楼2014-05-25 21:04:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-05-12 09:31:17
不纯是肯定的了,换换试剂盒吧,要不自己配制

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
2楼2014-05-12 06:44:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-05-25 23:03:29
切的时间太长了,切碎了
3楼2014-05-12 10:10:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lotus617

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-12 06:44:11
不纯是肯定的了,换换试剂盒吧,要不自己配制

谢谢你的回复,我用的天根的质粒小提中量试剂盒,唉!怎么那么多条带?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-05-12 11:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lotus617

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-12 10:10:26
切的时间太长了,切碎了

我切啦各种时间点的,都是这样!10~20~30~40~60~120Min。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-05-12 11:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by Lotus617 at 2014-05-12 11:14:35
谢谢你的回复,我用的天根的质粒小提中量试剂盒,唉!怎么那么多条带?
...

二楼也对,切时间太长了?做不出来什么都有可能

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
6楼2014-05-12 11:16:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提的不好,条带太多了。
7楼2014-05-12 12:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-05-12 15:21:32
LZ用的内切酶是快切酶还是普通酶啊,快切酶10分钟就切好了,如果切5分钟就能把质粒切碎那酶就不能用,换其他公司的吧,有些内切酶要添加BSA,你看看说明书上有没有说明,从图上看第二张图的78E好像切的还可以。
大家相互帮助哈
8楼2014-05-12 14:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-12 22:58:22
很显然,既然你切10分钟都是这个样子,那么你的质粒本身存在严重的降解,就是说没有用酶切,自己就碎了,如果是老质粒,说明降解严重,如果是新提的,说明压根就没提出来
9楼2014-05-12 17:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lotus617

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-12 06:44:11
不纯是肯定的了,换换试剂盒吧,要不自己配制

今天我又把之前提的质粒拿来跑了一次,1%gel.有人说还可以,我也不确定到底可用不可用!请你们帮我看看!
求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-5
未酶切质粒A 1  2014-05-12 11hr 56min_2345看图王.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-6
未酶切质粒B 1  2014-05-12 11hr 56min_2345看图王.jpg


求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!!-7
78凝胶回收A 3 2014-05-12 15hr 58min.jpg

10楼2014-05-12 21:55:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Lotus617 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703调剂 +14 拾玖壹 2026-04-04 16/800 2026-04-06 23:03 by chenzhimin
[考研] 工科 22408 267求推荐 +4 wanwan00 2026-04-05 5/250 2026-04-06 22:47 by chenzhimin
[考研] 071000生物学调剂 +7 拉提桃 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:55 by 52305043001
[考研] 270分求调剂 +5 maxjxbsk 2026-04-01 5/250 2026-04-06 15:32 by lin-da
[考研] 找调剂 +10 楚乔乔 2026-04-01 10/500 2026-04-05 22:19 by syh9288
[考研] 085600,320分求调剂 +7 大馋小子 2026-04-01 8/400 2026-04-05 21:19 by 学员8dgXkO
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +6 双马尾痞老板2 2026-03-31 6/300 2026-04-04 22:29 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 20:49 by 蓝云思雨
[考研] 324求调剂 +14 想上学求调 2026-04-02 15/750 2026-04-04 20:31 by 无际的草原
[考研] 302求调剂一志愿华中师范大学 +8 小江小江江江 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:50 by 蓝云思雨
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 363求调剂 +7 zh096 2026-04-04 7/350 2026-04-04 17:13 by dongzh2009
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 322求调剂 +6 FZAC123 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:23 by 科研小专家
[考研] 一志愿华东理工大学,080500学硕,317分,求调剂 +13 s1145 2026-03-31 15/750 2026-04-03 11:44 by msi123
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术,求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见