| 查看: 2058 | 回复: 5 | |||
[交流]
【求助/交流】质粒pPICZA酶切问题 已有3人参与
|
| 请问有人用过SacII和PmlI对pPICZA进行过双酶切吗？我用的是NEB的酶，用SacII和PmlI双酶切质粒pPICZA和PCR产物（1Kb），酶切缓冲液和质粒的量都严格按照说明书进行，并切了12h。然后进行连接转化，提取转化子质粒发现这些转化子都是假阳性，提取出的质粒的大小与载体pPICZA相当，这应该是载体自连导致的。请问是不是用SacII和PmlI很难将pPICZA酶切干净？谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有229人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环形质粒酶切电泳图分析求解
已经有25人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 质粒双酶切问题
已经有16人回复
- 重组质粒双酶切问题
已经有5人回复
- 质粒酶切后消失了
已经有11人回复
- 【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？
已经有24人回复
- 【求助/交流】质粒双酶切连接问题
已经有7人回复
- 关于质粒双酶切问题，感激不尽啊~在站里搜了，但是还是找不到我想要的答案，55~
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
已经有18人回复
- 【问题反馈】质粒双酶切切下120bp每次都看不到？
已经有21人回复
- 【求助/交流】表达载体构建不成功的原因
已经有27人回复
hyw1989960
木虫 (正式写手)
快乐家族二十八
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2687.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 629
- 在线: 137.4小时
- 虫号: 993370
- 注册: 2010-04-10
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
2楼2010-05-19 14:37:28
3楼2010-05-19 16:27:17
呵呵，那怎么可能不回收就去连接呢。载体和PCR产物酶切12h后，利用QIAGENE的试剂盒进行纯化，然后才去连接的。切了那么久还是自连，郁闷啊 4楼2010-05-19 21:50:50
请教一下，那我的PCR产物是不是也应该要分步去切呢？5楼2010-05-19 21:53:24
6楼2010-05-20 10:16:06
40