应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【问题反馈】质粒双酶切切下120bp每次都看不到？
221/3返回列表123下一页
查看: 2676  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wwdxx2004

金虫 (正式写手)

[交流] 【问题反馈】质粒双酶切切下120bp每次都看不到？ 已有18人参与

质粒6800bp,双酶切后切下120bp,每次跑电泳都看不到120的条带。另外一条大的条带很亮，是不是没有切开呢，反正用于下步连接也不出结果，不吝赐教！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验操作

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-14 23:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢回复~ 2010-09-15 09:41:54
应该是量太小了，给你计算了下，小片段120 bp，要看到的话，至少要20 ng（相当于5uL maker中弱带的亮度），酶切时6800 bp的大片段和120 bp的小片段摩尔数是一样的，这样的话，计算下来，你想看到120 bp的小片段，至少要切1.2 ug以上的载体，这个量需求还是比较大的。
赞一下(4人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
7楼2010-09-15 09:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zdmei

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
电泳点个质粒作对照，闭合环状的质粒和切开的是有差别
赞一下(3人) 回复此楼
9楼2010-09-15 12:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对，应该是量太少了，可以找找其他酶切位点，把片段切的长一点。或者加大质粒的量，或者做pcR验证，同时加上没有目的条带的质粒做阴性对照。。。
赞一下(2人) 回复此楼
加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
5楼2010-09-15 09:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流，欢迎常来~ 2010-09-15 00:07:18
是不是胶太短了，6800：120，估计你的120的都跑到缓冲液里了
最好上个图看看
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-09-14 23:27:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwdxx2004

金虫 (正式写手)
应该没有，marker100bp还可以看的到的。我认为就是量太小了，所以看不到120bp的条带。
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-15 08:55:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohui-eric

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-09-15 08:55:15:
应该没有，marker100bp还可以看的到的。我认为就是量太小了，所以看不到120bp的条带。

这个可能行比较大
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-09-15 08:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lu_zl

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-09-15 09:42:10
EB的发光强度与片段大小是成正比的。片段越大，插入的EB越多，越容易观察到。同样mol的小片段当然就看不到。所以加大质粒的量，顺便加大酶量，延长酶切时间，都可以改善。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-09-15 09:35:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfxt001

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-09-15 09:37:22:
应该是量太小了，给你计算了下，小片段120 bp，要看到的话，至少要20 ng（相当于5uL maker中弱带的亮度），酶切时6800 bp的大片段和120 bp的小片段摩尔数是一样的，这样的话，计算下来，你想看到120 bp的小片段， ...

这个正解
回复此楼
8楼2010-09-15 10:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zdmei at 2010-09-15 12:54:23:
电泳点个质粒作对照，闭合环状的质粒和切开的是有差别

说的也是
回复此楼
10楼2010-09-15 13:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wwdxx2004 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料复试求调剂 +7 xhhdjdjsjks 2026-04-09 7/350 2026-04-09 16:53 by luoyongfeng
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-06 14/700 2026-04-08 23:00 by 猪会飞
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 生物学学硕，初试351分，求调剂 +4 …～、王…～ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +10 vants 2026-04-05 11/550 2026-04-08 16:02 by screening
[考研] 274求调剂求调剂 +10 Jachenbingoo 2026-04-06 13/650 2026-04-08 14:25 by zhq0425
[考研] 求调剂 +28 111623 2026-04-04 33/1650 2026-04-08 09:24 by 泽润东方
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 专硕085403，291分，有两篇专利，一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +11 大火山小火山 2026-04-05 11/550 2026-04-06 22:55 by yunlongyang
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-03 14/700 2026-04-05 18:20 by 蓝云思雨
[考研] 085500机械专硕初试288求调剂 +3 GZJguo666- 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:06 by jkddd
[考研] 一志愿北京化工大学，初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 330求调剂 +3 白神呜呼呼 2026-04-02 3/150 2026-04-03 10:15 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭