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fisherdr

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
学习了。正准备开始做。
11楼2010-09-15 14:34:25
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tj_fjl

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
120BP怎么看得到,你要切多少质粒才行啊!
12楼2010-09-16 09:25:22
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zdmei at 2010-09-15 12:54:23:
电泳点个质粒作对照,闭合环状的质粒和切开的是有差别

这个方法好,应该还是有区别的,跑个胶看看
13楼2010-09-16 14:49:29
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jia1012428

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
学习学习!!!
14楼2010-09-16 20:23:45
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
叫应该用2.0%的,marker用DL500,一般10ul体系,切5ul,肯定能看到。
梦在路就在!
15楼2010-09-16 20:40:21
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Silencess

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我之前想切一个55BP的片段也是死活检测不到。后来直接去测序了,,还好片断没有错。。。
繁花似錦,年華散盡。
16楼2010-09-16 20:58:58
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stephenreal

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-09-14 23:23:43:
质粒6800bp,双酶切后切下120bp,每次跑电泳都看不到120的条带。另外一条大的条带很亮,是不是没有切开呢,反正用于下步连接也不出结果,不吝赐教!

跑胶时不要加EB,跑完(注意无EB时,时间大约缩短1/3)后,胶浸泡在EB染液中染色,详见分子克隆的附录,量少、分子量小的也很清楚。
17楼2010-09-16 21:13:06
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

引用回帖:
Originally posted by zdmei at 2010-09-15 12:54:23:
电泳点个质粒作对照,闭合环状的质粒和切开的是有差别

不过他是双切,万一只进行了单切就看不出来了,总之还是切下的片段太小
一直向前!
18楼2010-09-17 10:19:37
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-09-17 16:30:59
用低浓度的胶跑电泳,时间缩短,时间长 容易跑出来;
双酶切,三个小时;
空质粒跑一个孔做对照。最后不行的话,
换个酶切
严于律己,宽以待人
19楼2010-09-17 10:34:32
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)

已经连上啦,说明之前的切开了,只是没有看到,谢谢大家的回复。
20楼2010-09-18 11:33:56
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