应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【问题反馈】质粒双酶切切下120bp每次都看不到？
221/3返回列表123下一页
查看: 2601  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wwdxx2004

金虫 (正式写手)

[交流] 【问题反馈】质粒双酶切切下120bp每次都看不到？ 已有18人参与

质粒6800bp,双酶切后切下120bp,每次跑电泳都看不到120的条带。另外一条大的条带很亮，是不是没有切开呢，反正用于下步连接也不出结果，不吝赐教！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验操作

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-14 23:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢回复~ 2010-09-15 09:41:54
应该是量太小了，给你计算了下，小片段120 bp，要看到的话，至少要20 ng（相当于5uL maker中弱带的亮度），酶切时6800 bp的大片段和120 bp的小片段摩尔数是一样的，这样的话，计算下来，你想看到120 bp的小片段，至少要切1.2 ug以上的载体，这个量需求还是比较大的。
赞一下(4人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
7楼2010-09-15 09:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zdmei

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
电泳点个质粒作对照，闭合环状的质粒和切开的是有差别
赞一下(3人) 回复此楼
9楼2010-09-15 12:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zplipeng

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对，应该是量太少了，可以找找其他酶切位点，把片段切的长一点。或者加大质粒的量，或者做pcR验证，同时加上没有目的条带的质粒做阴性对照。。。
赞一下(2人) 回复此楼
加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
5楼2010-09-15 09:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流，欢迎常来~ 2010-09-15 00:07:18
是不是胶太短了，6800：120，估计你的120的都跑到缓冲液里了
最好上个图看看
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-09-14 23:27:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwdxx2004

金虫 (正式写手)
应该没有，marker100bp还可以看的到的。我认为就是量太小了，所以看不到120bp的条带。
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-15 08:55:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohui-eric

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-09-15 08:55:15:
应该没有，marker100bp还可以看的到的。我认为就是量太小了，所以看不到120bp的条带。

这个可能行比较大
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-09-15 08:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lu_zl

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-09-15 09:42:10
EB的发光强度与片段大小是成正比的。片段越大，插入的EB越多，越容易观察到。同样mol的小片段当然就看不到。所以加大质粒的量，顺便加大酶量，延长酶切时间，都可以改善。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-09-15 09:35:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfxt001

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-09-15 09:37:22:
应该是量太小了，给你计算了下，小片段120 bp，要看到的话，至少要20 ng（相当于5uL maker中弱带的亮度），酶切时6800 bp的大片段和120 bp的小片段摩尔数是一样的，这样的话，计算下来，你想看到120 bp的小片段， ...

这个正解
回复此楼
8楼2010-09-15 10:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zdmei at 2010-09-15 12:54:23:
电泳点个质粒作对照，闭合环状的质粒和切开的是有差别

说的也是
回复此楼
10楼2010-09-15 13:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wwdxx2004 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +6 Ncdx123456 2026-03-19 6/300 2026-03-20 17:40 by 无懈可击111
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 287求调剂 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 5/250 2026-03-20 16:42 by Iveryant
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +6 adaie 2026-03-19 6/300 2026-03-20 14:12 by 星空星月
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +9 chaojifeixia 2026-03-19 10/500 2026-03-20 12:29 by lature00
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 14/700 2026-03-20 09:30 by kkcoco25
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +9 一鸭鸭哟 2026-03-14 11/550 2026-03-19 17:22 by ！本暗一次！
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭