应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pMD18-T载体不需要酶切吗
111/2返回列表12下一页
查看: 6288  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

额敏的雪

金虫 (著名写手)

[求助] pMD18-T载体不需要酶切吗 已有1人参与

为什么将带有相应酶切位点的基因连入pMD18-T载体时不需要对载体进行酶切？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-28 13:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
额敏的雪: 金币+2 2013-01-28 15:45:44
一般的taq酶做PCR时，PCR产物末端有突出的碱基A，pMD18-T载体有突出的碱基T，AT是互补的，故可以连接上
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-28 13:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武京帅

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用的是TA克隆的方法  如楼上所说 不用再切了就
赞一下 回复此楼
To be all you what you can be!
3楼2013-01-28 15:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
嗯，楼上两位说的很正确，附和下！
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
4楼2013-01-28 17:23:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先是不用酶切T载体，如上。其次要保证你的PCR产物有末端A，并不是所有扩增酶都有这个自动加A的功能，如PFU高保真酶
赞一下 回复此楼
毕业回望科研路，满目疮痍一身土
5楼2013-01-28 21:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不切
这个载体是个线性的，直接用
你用高保真酶PCR一般没有尾端加A，所以P完还得用普通的酶孵育下，加个A，就可以了，如果本身用的酶就有加A就不用孵育
两个直接连，就可以了
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-28 22:52:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

额敏的雪

金虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mamadexiao at 2013-01-28 22:52:46
不切
这个载体是个线性的，直接用
你用高保真酶PCR一般没有尾端加A，所以P完还得用普通的酶孵育下，加个A，就可以了，如果本身用的酶就有加A就不用孵育
两个直接连，就可以了

谢谢
回复此楼
7楼2013-01-29 10:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CUISHENGRONG

新虫 (小有名气)
好棒啊 谢谢各位

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
8楼2017-09-23 21:56:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

左手abby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mamadexiao at 2013-01-28 22:52:46
不切
这个载体是个线性的，直接用
你用高保真酶PCR一般没有尾端加A，所以P完还得用普通的酶孵育下，加个A，就可以了，如果本身用的酶就有加A就不用孵育
两个直接连，就可以了

我最近在做加A，但是总是加不上，请问你做加A都是怎么的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-09-24 22:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王查查23

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
10楼2017-09-25 07:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 额敏的雪 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by 我的船我的海
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 东南大学364求调剂 +4 JasonYuiui 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:36 by Linda Hu
[考研] 调剂 +8 调剂的考研学生 2026-03-09 8/400 2026-03-15 22:14 by Winj1e
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考博] 读博申请 +5 感dd 2026-03-10 7/350 2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭