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wwling

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】克隆测序无信号已有13人参与

用pMD18-T载体连了约1000bp的目的基因,白斑用扩目的基因的引物PCR检测是阳性的,酶切鉴定也符合,送菌液出去测序却测不出来,说无信号。想问问大家,有必要换个公司测一下吗?还是需要改进实验?
  大家有没有碰到这样的问题,如何避免呢?
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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amisking(金币+1): 2010-04-28 13:28
有可能是质粒没有提好,但是估计是公司测序的问题,公司用的什么引物,你应该问问,你应该给出建议引物,如果不行,就换一家试试,找个好公司,省心啊
2楼2010-04-28 13:14:21
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

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1949stone(金币+1):maybe 2010-04-28 14:46
可能是公司测序的问题
3楼2010-04-28 13:39:53
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zdj123727

铜虫 (小有名气)


1949stone(金币+1):我也常遇到 2010-04-28 14:46
是公司的测序问题吧,我也经常送样测序说没信号的
4楼2010-04-28 13:56:02
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zdj123727

铜虫 (小有名气)

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1949stone(金币+1):是么? 2010-04-28 14:46
再做一遍,送去测序就好了啊
5楼2010-04-28 13:56:40
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liyong1981

金虫 (正式写手)


公司的问题~
6楼2010-04-28 15:01:28
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那就送质粒试试吧。送菌液有时就是会碰到这种情况的。
7楼2010-04-28 15:25:13
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wwling

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-04-28 15:25:13:
那就送质粒试试吧。送菌液有时就是会碰到这种情况的。

那个公司说他们是用我给的菌液提了质粒 没测出来
恩 今天换公司测一些试试
8楼2010-04-28 18:01:19
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nklyw

木虫 (正式写手)

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plantaqp(金币+1):欢迎交流 2010-05-06 20:44:09
还可能是质粒的浓度太高了,不过这种可能比较小。
9楼2010-04-28 23:22:57
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zhangjingfei01

木虫 (正式写手)

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plantaqp(金币+1):欢迎交流 2010-05-06 20:43:45
有可能是有杂菌,好公司就是宝生物了。不过比较贵,而且时间久,要1周多。但是信号弱人家也能测出来。
10楼2010-05-04 16:50:59
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