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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】克隆测序无信号
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wwling

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】克隆测序无信号 已有13人参与

用pMD18-T载体连了约1000bp的目的基因，白斑用扩目的基因的引物PCR检测是阳性的，酶切鉴定也符合，送菌液出去测序却测不出来，说无信号。想问问大家，有必要换个公司测一下吗？还是需要改进实验？
  大家有没有碰到这样的问题，如何避免呢？
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1楼 2010-04-28 13:09:12
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-28 13:28
有可能是质粒没有提好，但是估计是公司测序的问题，公司用的什么引物，你应该问问，你应该给出建议引物，如果不行，就换一家试试，找个好公司，省心啊
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2楼2010-04-28 13:14:21
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★ ★
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1949stone(金币+1):maybe 2010-04-28 14:46
可能是公司测序的问题
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3楼2010-04-28 13:39:53
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zdj123727

铜虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1):我也常遇到 2010-04-28 14:46
是公司的测序问题吧，我也经常送样测序说没信号的
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4楼2010-04-28 13:56:02
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zdj123727

铜虫 (小有名气)
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1949stone(金币+1):是么？ 2010-04-28 14:46
再做一遍，送去测序就好了啊
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5楼2010-04-28 13:56:40
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liyong1981

金虫 (正式写手)
公司的问题～
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6楼2010-04-28 15:01:28
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那就送质粒试试吧。送菌液有时就是会碰到这种情况的。
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7楼2010-04-28 15:25:13
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wwling

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-04-28 15:25:13:
那就送质粒试试吧。送菌液有时就是会碰到这种情况的。

那个公司说他们是用我给的菌液提了质粒 没测出来
恩 今天换公司测一些试试
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8楼2010-04-28 18:01:19
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nklyw

木虫 (正式写手)
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plantaqp(金币+1):欢迎交流 2010-05-06 20:44:09
还可能是质粒的浓度太高了，不过这种可能比较小。
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9楼2010-04-28 23:22:57
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zhangjingfei01

木虫 (正式写手)
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plantaqp(金币+1):欢迎交流 2010-05-06 20:43:45
有可能是有杂菌，好公司就是宝生物了。不过比较贵，而且时间久，要1周多。但是信号弱人家也能测出来。
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10楼2010-05-04 16:50:59
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