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1楼2013-01-28 13:07:02

yesali

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【答案】应助回帖

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额敏的雪: 金币+2 2013-01-28 15:45:44

一般的taq酶做PCR时，PCR产物末端有突出的碱基A，pMD18-T载体有突出的碱基T，AT是互补的，故可以连接上

2楼2013-01-28 13:17:19

武京帅

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用的是TA克隆的方法如楼上所说不用再切了就

To be all you what you can be!

3楼2013-01-28 15:09:02

lidonghong

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嗯，楼上两位说的很正确，附和下！

生物化学与分子生物学

4楼2013-01-28 17:23:16

qiyaocheng

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首先是不用酶切T载体，如上。其次要保证你的PCR产物有末端A，并不是所有扩增酶都有这个自动加A的功能，如PFU高保真酶

毕业回望科研路，满目疮痍一身土

5楼2013-01-28 21:12:47

mamadexiao

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不切
这个载体是个线性的，直接用
你用高保真酶PCR一般没有尾端加A，所以P完还得用普通的酶孵育下，加个A，就可以了，如果本身用的酶就有加A就不用孵育
两个直接连，就可以了

6楼2013-01-28 22:52:46

额敏的雪

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引用回帖:

6楼: Originally posted by mamadexiao at 2013-01-28 22:52:46
不切
这个载体是个线性的，直接用
你用高保真酶PCR一般没有尾端加A，所以P完还得用普通的酶孵育下，加个A，就可以了，如果本身用的酶就有加A就不用孵育
两个直接连，就可以了

谢谢

7楼2013-01-29 10:51:16