应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大侠们，帮我看一下这对引物的酶切位点是什么？
211/3返回列表123下一页
查看: 2169  |  回复: 20
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fit3525

新虫 (初入文坛)

[求助] 大侠们，帮我看一下这对引物的酶切位点是什么？

CGTTTCCCGTTACTCTTCT
GGATTTCGGCCCAGAAACT
我需要做酶切T18载体上，引物是别人设计的，我不知道用什么酶切好？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-09-21 11:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实不相瞒，我还真没在你的引物里找到酶切位点。。。
赞一下(2人) 回复此楼
有时候，一句话，可以改变未来
2楼2012-09-21 11:40:53
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fit3525

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-21 11:40:53
实不相瞒，我还真没在你的引物里找到酶切位点。。。

您的意思是没有酶切位点吗？
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-09-21 11:51:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by fit3525 at 2012-09-21 11:51:42
您的意思是没有酶切位点吗？...

是的，么有一个特异性的酶切位点。
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

dudusdau
4楼2012-09-21 12:55:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-24 10:18:46
fit3525: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-19 21:35:52
直接PCR，产物胶回收后连接T载体就好了。当然如果对保真性要求较高，可以采用高保真酶PCR目的条带，回收目标条带后用普通Taq酶加A尾后连接T载体。
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2012-09-23 21:50:18
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
fit3525: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-12-19 21:35:38
引用回帖:
3楼: Originally posted by fit3525 at 2012-09-21 11:51:42
您的意思是没有酶切位点吗？...

酶切位点都是回文序列，而楼主提供的引物没有

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
有时候，一句话，可以改变未来
5楼2012-09-21 13:00:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dudusdau

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-21 12:55:56
是的，么有一个特异性的酶切位点。...

那要是做酶切连接到pmd18-t上，怎么连啊？我是小白，请大侠帮我一下！
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-09-21 13:04:07
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-21 14:25:33
fit3525: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-19 21:36:01
引用回帖:
6楼: Originally posted by dudusdau at 2012-09-21 13:04:07
那要是做酶切连接到pmd18-t上，怎么连啊？我是小白，请大侠帮我一下！...

pmd18-t载体还是比较小的，不建议你用双酶切的方法去连接。
你可以设计引物将载体PCR出来。
再PCR你的目的基因，再共转化，这样效果比较好。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2012-09-21 13:14:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

fit3525

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-21 12:55:56
是的，么有一个特异性的酶切位点。...

那要是做酶切连接到pmd18-t上，怎么连啊？我是小白，请大侠帮我一下！
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-21 13:07:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fit3525

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-21 13:00:39
酶切位点都是回文序列，而楼主提供的引物没有
...

那要是做酶切连接到pmd18-t上，怎么连啊？我是小白，请大侠帮我一下！
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-21 13:09:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fit3525

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-21 11:40:53
实不相瞒，我还真没在你的引物里找到酶切位点。。。

那要是做酶切连接到pmd18-t上，怎么连啊？我是小白，请大侠帮我一下！
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-21 13:10:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fit3525 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭