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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[求助] 请教各位大侠,我的PCR怎么连引物二聚体都没有啊,请问一下是什么原因造成的呢?

请教各位大侠,我的PCR怎么连引物二聚体都没有啊,请问一下是什么原因造成的呢?不知道下面那两个没有下面的带是什么原因,是我的引物设计的有问题还是PCR的温度太高了呢?谢谢各位大侠指教!
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l_h_10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-21 13:34:33
PCR的温度有没有做梯度?你的条带是怎么分布的?第二条有条带的,引物二聚体也很多。貌似第五条也是引物二聚体吧, 不知道你的目的条带的分子量是多少?
2楼2012-06-20 20:46:48
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黎明前的明

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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引物太大了还是你没做的梯度,温度设置不好
3楼2012-06-20 22:17:23
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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 黎明前的明 at 2012-06-20 22:17:23
引物太大了还是你没做的梯度,温度设置不好

引物不大啊,一个16 一个18的,温度可能没做好吧
4楼2012-06-21 13:50:34
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
也有可能你的产物浓度太低,而你的PCR产物没混匀,导致你点样的时候恰巧没点出来
5楼2012-06-22 16:52:55
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