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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 【求助/交流】问个白痴的问题，怎么设计引物并加上酶切位点？！
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lim1896

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】问个白痴的问题，怎么设计引物并加上酶切位点？！ 已有6人参与

cDNA序列有了，头疼的是引物设计软件不会用，也不会判断引物好坏，更不会加酶切位点，不知道有没有耐心的大侠帮帮小弟！莫鄙视，小弟实在是不会啊……
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1楼 2010-11-28 15:12:40
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good！ 2010-11-28 19:21:13
好说
你用primer5.0
下个中文说明书就行了
这个网上有的，照着说明书设计引物基本差不多的
注意参数就行了
做点耐心，一般是能设计出引物的，可能不会太好，但是P出来还是问题不大的。
至于酶切位点就是你在设计完引物后，分别在引物的5‘端加上一半（就是酶切的那半个）酶切位点的碱基就行了。
赞一下(3人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
2楼2010-11-28 15:53:22
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yuanbo934

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
补充楼上一下，在酶切位点前别忘了加两三个保护碱基
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3楼2010-11-28 16:47:11
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yinsongna

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
找个师兄师姐给你演示一下，你立马就明白了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-11-28 19:10:08
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2010-11-28 15:53:22:
好说
你用primer5.0
下个中文说明书就行了
这个网上有的，照着说明书设计引物基本差不多的
注意参数就行了
做点耐心，一般是能设计出引物的，可能不会太好，但是P出来还是问题不大的。
至于酶切位点就是你在 ...

貌似hu的意思是在引物上加一半的酶切序列，P完之后直接可以连载体？
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
5楼2010-11-28 20:14:49
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602059625

金虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2010-11-28 15:53:22:
好说
你用primer5.0
下个中文说明书就行了
这个网上有的，照着说明书设计引物基本差不多的
注意参数就行了
做点耐心，一般是能设计出引物的，可能不会太好，但是P出来还是问题不大的。
至于酶切位点就是你在 ...

酶切的那半个

什么半个
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[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
6楼2010-11-28 20:18:22
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 602059625 at 2010-11-28 20:18:22:

酶切的那半个

什么半个

你个小白你回家好好看书去吧
不要老问一些很白的问题
显得你很无知就很光荣吗
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
7楼2010-11-29 16:52:30
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范儿

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by jhu132llh at 2010-11-29 16:52:30
你个小白你回家好好看书去吧
不要老问一些很白的问题
显得你很无知就很光荣吗...

别人不懂，你怎么可以这么说呢
赞一下 回复此楼
说到不如做到，要做就做最好！
8楼2014-03-05 14:29:43
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