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lim1896

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】问个白痴的问题,怎么设计引物并加上酶切位点?! 已有6人参与

cDNA序列有了,头疼的是引物设计软件不会用,也不会判断引物好坏,更不会加酶切位点,不知道有没有耐心的大侠帮帮小弟!莫鄙视,小弟实在是不会啊……
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yinsongna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
找个师兄师姐给你演示一下,你立马就明白了
4楼2010-11-28 19:10:08
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good! 2010-11-28 19:21:13
好说
你用primer5.0
下个中文说明书就行了
这个网上有的,照着说明书设计引物基本差不多的
注意参数就行了
做点耐心,一般是能设计出引物的,可能不会太好,但是P出来还是问题不大的。
至于酶切位点就是你在设计完引物后,分别在引物的5‘端加上一半(就是酶切的那半个)酶切位点的碱基就行了。
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2010-11-28 15:53:22
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
补充楼上一下,在酶切位点前别忘了加两三个保护碱基
3楼2010-11-28 16:47:11
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2010-11-28 15:53:22:
好说
你用primer5.0
下个中文说明书就行了
这个网上有的,照着说明书设计引物基本差不多的
注意参数就行了
做点耐心,一般是能设计出引物的,可能不会太好,但是P出来还是问题不大的。
至于酶切位点就是你在 ...

貌似hu的意思是在引物上加一半的酶切序列,P完之后直接可以连载体?
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
5楼2010-11-28 20:14:49
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