应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物酶切后电泳跑成这样 费解啊！！！
301/3返回列表123下一页
查看: 4005  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

忘忧草_

木虫 (正式写手)

[求助] pcr产物酶切后电泳跑成这样 费解啊！！！ 已有1人参与

pcr产物直接酶切（PdmI），然后用1XTBE缓冲液，3%琼脂糖凝胶电泳60V跑了一个小时，结果出先了诡异的条带，酶切部分条带变成了弧形，特别是和ladder接着的地方，为了排除其他影响，特意点了很多ladder，发现ladder都没问题，郁闷啊，求各位大侠给看看怎么回事啊！！！

12.18.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不将就
1楼 2012-12-19 11:22:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

望海思月

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-19 18:52:15
应该是制胶的问题，胶不均匀就会出现这种现象的
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-12-19 16:23:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)
顶！！！！！！！！！！！1
2楼2012-12-19 11:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-19 11:55:16
MARKER有部分也歪了

产物没有问题，应该是你电泳条件不好。1，缓冲液没有把胶掩盖住；2，电极丝歪了；3，胶配的不好，冷却过头了
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-19 11:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2012-12-19 11:35:20
MARKER有部分也歪了

产物没有问题，应该是你电泳条件不好。1，缓冲液没有把胶掩盖住；2，电极丝歪了；3，胶配的不好，冷却过头了

缓冲液都盖住了
电极丝不确定 我试了个电泳槽 也出现类似的情况 但是如果只跑pcr产物就没事 难道是酶切体系里面的一些物质在跑电泳时和胶发生了反应
而且这个图也只有酶切部分有问题 ladder都没问题啊
赞一下 回复此楼
不将就
4楼2012-12-19 11:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-19 18:53:56
我觉得很可能是电极丝歪了 哈哈
赞一下 回复此楼
人生最黑暗的时光终于过去了
6楼2012-12-19 16:29:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-19 18:54:21
兩個可能性吧，一個是膠有問題，不均勻；另一個是你的樣品里有社麼讓樣品變的粘了？
赞一下 回复此楼
我会绕一个圈，走回到实验室
7楼2012-12-19 16:42:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyy4581

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-19 18:57:40
胶没做好的可能性较大吧！另外，杂带太多了，不知是不是引物的问题呢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
8楼2012-12-19 17:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by btx362237729 at 2012-12-19 16:29:03
我觉得很可能是电极丝歪了 哈哈

这个我师弟换了TAE缓冲液 1%的胶 跑1000多的PCR片段没问题啊
赞一下 回复此楼
不将就
9楼2012-12-19 18:53:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by loveskyzhou at 2012-12-19 16:42:42
兩個可能性吧，一個是膠有問題，不均勻；另一個是你的樣品里有社麼讓樣品變的粘了？

我也猜测是不是酶切体系的问题 体系里面有什么让胶在电泳时发生了变化 我的酶切体系是
pcr产物5 ul
酶       1 ul
buffer  1 ul
水       3 ul
赞一下 回复此楼
不将就
10楼2012-12-19 18:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 忘忧草_ 的主题更新
301/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-14 15:58 by KXypaGgBBlw7
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-14 13:02 by KXypaGgBBlw7
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:11 by Equinoxhua
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 10:03 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:25 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭