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小皮球邓

铜虫 (小有名气)

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★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励分享经验 2011-05-10 18:01:36

以我做酶切的经验，影响酶切效果有以下几个因素，总体积，目的片段浓度，酶切时间。

坚持就是胜利！

2楼2011-05-10 17:16:59

天使托

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T.Shen

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★ ★ ★
西瓜(金币+3): 天使再次降临，哈哈~ 2011-05-11 00:24:20

酶切完有没有进行纯化，如果是的话，很有可能是给纯化没了。。。

Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

3楼2011-05-10 20:51:28

475502411

铜虫 (著名写手)

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西瓜(金币+3): 鼓励应助。最近上镜率很高，表扬个~O(∩_∩)O哈哈~ 2011-05-11 00:25:07

你确定你连接上了，而不是智力的自连？
如果确定你试试5小时酶切吧，体系没问题

可以朝九晚五，也能浪迹天涯

4楼2011-05-10 20:51:40

bbwalkman

木虫 (小有名气)

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★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎交流。楼主说胶回收后检测到有条带哦。 2011-05-11 00:26:23

酶切体系没问题酶切时间可以了啊我做的时候1-2个小时没问题~你切胶回收是不是操作有失误导致没有回收产物？

5楼2011-05-10 21:51:30

如来神掌

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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 10:26:08

胶回收以后经过纯化然后进行检测纯化产物并估量不知道你做了没有？

另外你对你的目的片段中的酶切位点最好再仔细分析一下。

生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!

6楼2011-05-11 08:47:30

manman424

禁虫 (初入文坛)

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7楼2011-05-11 09:49:44

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引用回帖:

Originally posted by manman424 at 2011-05-11 09:49:44:
胶回收后进行电泳检测了，回收到了东西，但是就是酶切后电泳什么都检测不到，就算是酶切位点有问题，那也不应该什么都没有啊，包括我的pet30质粒也是这个情况，提质粒检测有东西，一作酶切再检测就什么也没有了 ...

如果可能的话请把你的制粒名称片段大小酶切位点说一下你的叙述很笼统

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生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!

8楼2011-05-11 17:11:46