应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物酶切后，电泳时遇到的的问题，真心求教！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
101/1返回列表
查看: 2763  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

波澜不惊

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR产物酶切后，电泳时遇到的的问题，真心求教！ 已有8人参与

我的PCR产物是250bp的片段，并在两端加了酶切位点：Xba I和Sac I。
然后我用OMEGA纯化试剂盒纯化后，进行双酶切，切后电泳很奇怪，如图：

在酶切之后，我又纯化后再跑电泳，又正常了。有很清晰的条带。用的酶是宝生物的，T Buffer并加了BSA。 这个体系我用问切过质粒很正常。

求教:是什么原因电泳跑成这样？这样的酶切产物两端切没切开？能不能用于后续的连接？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-03 20:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lmzxcom1(金币+1):鼓励积极交流！ 2010-07-03 21:21:35
胶制的不好,电压也不太稳
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-03 21:19:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
上样孔超载了
回复此楼
3楼2010-07-03 21:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
从表面来看，就是跑的太快了，电压高了或者不稳定，出现拖尾现象。可能这是偶尔现象，再试一次就应该差不多。
赞一下(1人) 回复此楼
哎哟~可爱QQ~不错哦~~
4楼2010-07-03 22:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

波澜不惊

铁虫 (初入文坛)
这不是一次的现象，重复几次了，都是这样，应该也不是电压和胶的问题，因为我们一直都在用，别的也都很正常。
赞一下 回复此楼
5楼2010-07-03 23:59:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

波澜不惊

铁虫 (初入文坛)
我的上样量是5微升。点样孔点20微升的酶切体系都是没问题的。
赞一下 回复此楼
6楼2010-07-04 00:03:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanglanfen

金虫 (小有名气)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-04 08:48:58
从表面来看，就是跑的太快了，电压高了或者不稳定，出现拖尾现象。可能这是偶尔现象，再试一次就应该差不多。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-07-04 00:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-04 08:48:47
酶切后点检测2ul就足够了，还有mark条带都能跑成这样，应该是胶或是电泳的原因
赞一下(2人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
8楼2010-07-04 00:10:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好，我想咨询一下，您的PCR体系是怎样的？酶切时是酶切了多少量的PCR产物啊？我的PCR产物酶切时从来没有这么亮过
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-23 10:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzzaazzzzz

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
图中可以很明显从MARKER看出你的凝胶制得不匀,靠近边缘的条带出现弧线，表明电压不稳。电泳缓冲液使用太久也会出现这样的问题
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-23 16:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 波澜不惊 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-05 17:54 by liucky
[考研] 385分 生物学（071000）求调剂 +11 qf626 2026-04-01 11/550 2026-04-05 17:35 by Ecowxq666！
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 数一英一 347 人工智能国奖论文都有求调剂 +3 乌拉儿山脉 2026-03-30 7/350 2026-04-05 10:32 by zhq0425
[考研] 一志愿上海大学生物学346 +3 上海大学346调剂 2026-04-03 3/150 2026-04-04 20:20 by dongzh2009
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +6 晚风不晚 2026-04-04 6/300 2026-04-04 20:11 by dongzh2009
[考研] 309求调剂 +6 刘刘刘1231 2026-04-02 7/350 2026-04-04 13:41 by liucky
[考研] 复试调剂 +3 bvzz 2026-04-01 3/150 2026-04-03 09:47 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿a区211，085601-307分求调剂 +13 党嘉豪 2026-03-31 26/1300 2026-04-03 08:33 by 495374996
[考研] 312求调剂 +4 赊月色 2026-04-02 5/250 2026-04-03 08:21 by fangshan711
[考研] 交通运输考试264分求工科调剂 +4 jike777 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:53 by zllcz
[考研] 085601一志愿中山大学深圳材料工程330求调剂 +8 pipiver 2026-03-30 8/400 2026-04-02 12:01 by ms629
[考研] 0856初试324分求调剂 +6 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 11:42 by 星空星月
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 279求调剂 +6 学而思兮知 2026-04-01 6/300 2026-04-02 09:16 by vgtyfty
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行 +25 lllllos 2026-03-30 26/1300 2026-04-01 09:52 by 一只好果子?
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭