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波澜不惊

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR产物酶切后,电泳时遇到的的问题,真心求教! 已有8人参与

我的PCR产物是250bp的片段,并在两端加了酶切位点:Xba I和Sac I。
然后我用OMEGA纯化试剂盒纯化后,进行双酶切,切后电泳很奇怪,如图:

在酶切之后,我又纯化后再跑电泳,又正常了。有很清晰的条带。用的酶是宝生物的,T Buffer并加了BSA。 这个体系我用问切过质粒很正常。

求教:是什么原因电泳跑成这样?这样的酶切产物两端切没切开?能不能用于后续的连接?
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-04 08:48:47
酶切后点检测2ul就足够了,还有mark条带都能跑成这样,应该是胶或是电泳的原因
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
8楼2010-07-04 00:10:19
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lmzxcom1(金币+1):鼓励积极交流! 2010-07-03 21:21:35
胶制的不好,电压也不太稳
2楼2010-07-03 21:19:24
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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
从表面来看,就是跑的太快了,电压高了或者不稳定,出现拖尾现象。可能这是偶尔现象,再试一次就应该差不多。
哎哟~可爱QQ~不错哦~~
4楼2010-07-03 22:23:12
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波澜不惊

铁虫 (初入文坛)

这不是一次的现象,重复几次了,都是这样,应该也不是电压和胶的问题,因为我们一直都在用,别的也都很正常。
5楼2010-07-03 23:59:36
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