应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物酶切后，电泳时遇到的的问题，真心求教！
51/1返回列表
查看: 2643  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

波澜不惊

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR产物酶切后，电泳时遇到的的问题，真心求教！ 已有8人参与

我的PCR产物是250bp的片段，并在两端加了酶切位点：Xba I和Sac I。
然后我用OMEGA纯化试剂盒纯化后，进行双酶切，切后电泳很奇怪，如图：

在酶切之后，我又纯化后再跑电泳，又正常了。有很清晰的条带。用的酶是宝生物的，T Buffer并加了BSA。 这个体系我用问切过质粒很正常。

求教:是什么原因电泳跑成这样？这样的酶切产物两端切没切开？能不能用于后续的连接？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-03 20:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzzaazzzzz

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
图中可以很明显从MARKER看出你的凝胶制得不匀,靠近边缘的条带出现弧线，表明电压不稳。电泳缓冲液使用太久也会出现这样的问题
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-23 16:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

小猫三两只

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lmzxcom1(金币+1):鼓励积极交流！ 2010-07-03 21:21:35
胶制的不好,电压也不太稳
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-03 21:19:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
从表面来看，就是跑的太快了，电压高了或者不稳定，出现拖尾现象。可能这是偶尔现象，再试一次就应该差不多。
赞一下(1人) 回复此楼
哎哟~可爱QQ~不错哦~~
4楼2010-07-03 22:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

波澜不惊

铁虫 (初入文坛)
这不是一次的现象，重复几次了，都是这样，应该也不是电压和胶的问题，因为我们一直都在用，别的也都很正常。
赞一下 回复此楼
5楼2010-07-03 23:59:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭