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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物酶切检测不到东西是为什么
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manman424

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2011-05-10 17:10:16
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小皮球邓

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励分享经验 2011-05-10 18:01:36
以我做酶切的经验，影响酶切效果有以下几个因素，总体积，目的片段浓度，酶切时间。
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坚持就是胜利！
2楼2011-05-10 17:16:59
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 天使再次降临，哈哈~ 2011-05-11 00:24:20
酶切完有没有进行纯化，如果是的话，很有可能是给纯化没了。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-05-10 20:51:28
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励应助。最近上镜率很高，表扬个~O(∩_∩)O哈哈~ 2011-05-11 00:25:07
你确定你连接上了，而不是智力的自连？
如果确定你试试5小时酶切吧，体系没问题
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
4楼2011-05-10 20:51:40
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎交流。楼主说胶回收后检测到有条带哦。 2011-05-11 00:26:23
酶切体系没问题 酶切时间可以了啊 我做的时候1-2个小时没问题~你切胶回收是不是操作有失误导致没有回收产物？
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5楼2011-05-10 21:51:30
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 10:26:08
胶回收以后经过纯化 然后进行检测纯化产物 并估量 不知道你做了没有？


另外你对你的目的片段中的酶切位点最好再仔细分析一下。
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生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
6楼2011-05-11 08:47:30
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manman424

禁虫 (初入文坛)
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7楼2011-05-11 09:49:44
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by manman424 at 2011-05-11 09:49:44:
胶回收后进行电泳检测了，回收到了东西，但是就是酶切后电泳什么都检测不到，就算是酶切位点有问题，那也不应该什么都没有啊，包括我的pet30质粒也是这个情况，提质粒检测有东西，一作酶切再检测就什么也没有了 ...

如果可能的话 请把你的制粒名称 片段大小 酶切位点 说一下 你的叙述很笼统
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生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
8楼2011-05-11 17:11:46
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manman424

禁虫 (初入文坛)
dhd997: 可以再第一楼编辑你的问题。 2011-05-13 09:11:35
本帖内容被屏蔽
9楼2011-05-12 20:53:35
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mjzjily

铜虫 (初入文坛)
你好，楼主，请问你现在问题解决了吗，我遇到类似的问题。恳请指导一下，谢谢
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扎实科研
10楼2012-09-14 20:20:58
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