应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 11985  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小木可

铁虫 (初入文坛)

[求助] 单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？ 已有4人参与

用PBI121质粒进行SmaI和XbaI双酶切，跑电泳回收时，发现酶切片段跑的比空质粒快。然后我又分别用两种酶做单酶切，跑电泳，发现单酶切和双酶切跑的位置一样，而且都比空质粒跑的快，这是什么原因呢？我上大二，目前真心搞不明白，求大神指导。图中从左到右依次是：marker   空质粒   SmaI   XbaI   SmaI+XbaI

单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？
2014.10.5.HZK1..jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-05 22:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-10-06 12:35:25
小木可: 金币+1 2014-10-06 17:20:33
酶切后的质粒比环状质粒快，2个酶切位点太接近时，双酶切和单酶切看不出差别。
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-06 09:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青师大涛声

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-06 12:35:39
空质粒的片段大于酶切片段，所以要慢些。
赞一下 回复此楼
好好做实验。
3楼2014-10-06 10:06:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

就会提核酸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-06 12:35:53
小木可: 金币+1 2014-10-06 17:21:33
质粒分三型：闭环，开环，线性。大部分情况下，的确都是闭环跑得比线性快。但是，下列几个因素的结合，可以导致闭环比线性跑得慢：高浓度胶，高电压，胶中 EB 浓度正好合适。更多知识，可参考卢圣栋主编的“现代分子生物学实验技术”。
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-06 10:59:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木可

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-06 09:28:57
酶切后的质粒比环状质粒快，2个酶切位点太接近时，双酶切和单酶切看不出差别。

是啊，单酶切跟双酶切看不出差别，可是酶切后的质粒成片段，比空质粒跑的还快，好神奇的感觉，后面的连接啥都不敢做了。
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-06 11:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a1353601094

新虫 (初入文坛)
为什么SmaI切的是2条带   SmaI与XbaI双切的只有1条带。。。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2014-10-06 16:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木可

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by a1353601094 at 2014-10-06 16:44:32
为什么SmaI切的是2条带   SmaI与XbaI双切的只有1条带。。。

这个我当时也看到了，老师说是星号活性，我觉得根本就没什么关系，现在又重新按照要求，改进了体系，跑电泳看看。
赞一下 回复此楼
7楼2014-10-06 17:19:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远一片天

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

环状质粒由于特殊的共价闭合结构，不能按照一般的线性DNA观察电泳，环状闭合质粒比一般线性DNA跑的慢，线性质粒跑的快，提取质粒时纯化的好的话会出现两条带，有时会出现三条带，均属于正常情况。酶切后，质粒被打开，变成线性双链DNA，自然会跑的较快，之所以你的单酶切和双酶切条带大小一样，是因为你的两个酶切位点相近，都处在质粒集中酶切位点的那段序列上，单酶会产生一个线性条带，双酶切切开后会产生两个条带，一个大条带，一个小条带，大条带跟单酶切大小相似，所以难以分清高低，双酶切产生的小条带实在太小，基本看不到。
赞一下(4人) 回复此楼
8楼2014-10-19 10:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小木可 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 华南理工0703化学，总分336求调剂 +5 手机用户 2026-04-03 5/250 2026-04-06 09:11 by 无际的草原
[考研] 考研调剂 +5 美丽的youth_ 2026-04-04 6/300 2026-04-06 06:57 by houyaoxu
[考研] 316求调剂 +5 yyx想调剂 2026-04-05 5/250 2026-04-05 22:22 by 咔咔咔咔9
[考研] 295求调剂 +10 xndjjj 2026-04-04 10/500 2026-04-05 11:19 by 猪会飞
[考研] 290求调剂085701 +10 1314捧花 2026-04-02 10/500 2026-04-05 10:19 by Sealedwind
[考研] 11408,335分，本科211，求调剂，可转专业 +5 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 5/250 2026-04-04 22:49 by chongya
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 309求调剂 +6 刘刘刘1231 2026-04-02 7/350 2026-04-04 13:41 by liucky
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-30 9/450 2026-04-04 11:04 by 猪会飞
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 085600 295分求调剂 +19 W55j 2026-03-30 23/1150 2026-04-03 09:53 by 千千运气
[考研] 0703化学 +7 goldtt 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:36 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-04-02 3/150 2026-04-02 15:06 by cal0306
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
[考研] 271求调剂 +15 勒布朗@ 2026-03-31 20/1000 2026-04-02 11:24 by Sammy2
[考研] 土木304求调剂 +6 兔突突突， 2026-03-31 7/350 2026-04-02 09:06 by coolminer
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-31 4/200 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭