应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？
51/1返回列表
查看: 11802  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小木可

铁虫 (初入文坛)

[求助] 单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？ 已有4人参与

用PBI121质粒进行SmaI和XbaI双酶切，跑电泳回收时，发现酶切片段跑的比空质粒快。然后我又分别用两种酶做单酶切，跑电泳，发现单酶切和双酶切跑的位置一样，而且都比空质粒跑的快，这是什么原因呢？我上大二，目前真心搞不明白，求大神指导。图中从左到右依次是：marker   空质粒   SmaI   XbaI   SmaI+XbaI

单酶切跟双酶切电泳条带一样，且都比空质粒跑的快，什么原因？
2014.10.5.HZK1..jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-05 22:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远一片天

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

环状质粒由于特殊的共价闭合结构，不能按照一般的线性DNA观察电泳，环状闭合质粒比一般线性DNA跑的慢，线性质粒跑的快，提取质粒时纯化的好的话会出现两条带，有时会出现三条带，均属于正常情况。酶切后，质粒被打开，变成线性双链DNA，自然会跑的较快，之所以你的单酶切和双酶切条带大小一样，是因为你的两个酶切位点相近，都处在质粒集中酶切位点的那段序列上，单酶会产生一个线性条带，双酶切切开后会产生两个条带，一个大条带，一个小条带，大条带跟单酶切大小相似，所以难以分清高低，双酶切产生的小条带实在太小，基本看不到。
赞一下(4人) 回复此楼
8楼2014-10-19 10:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-10-06 12:35:25
小木可: 金币+1 2014-10-06 17:20:33
酶切后的质粒比环状质粒快，2个酶切位点太接近时，双酶切和单酶切看不出差别。
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-06 09:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青师大涛声

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-06 12:35:39
空质粒的片段大于酶切片段，所以要慢些。
赞一下 回复此楼
好好做实验。
3楼2014-10-06 10:06:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

就会提核酸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-06 12:35:53
小木可: 金币+1 2014-10-06 17:21:33
质粒分三型：闭环，开环，线性。大部分情况下，的确都是闭环跑得比线性快。但是，下列几个因素的结合，可以导致闭环比线性跑得慢：高浓度胶，高电压，胶中 EB 浓度正好合适。更多知识，可参考卢圣栋主编的“现代分子生物学实验技术”。
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-06 10:59:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭