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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物酶切后电泳跑成这样 费解啊！！！
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忘忧草_

木虫 (正式写手)

[求助] pcr产物酶切后电泳跑成这样 费解啊！！！ 已有1人参与

pcr产物直接酶切（PdmI），然后用1XTBE缓冲液，3%琼脂糖凝胶电泳60V跑了一个小时，结果出先了诡异的条带，酶切部分条带变成了弧形，特别是和ladder接着的地方，为了排除其他影响，特意点了很多ladder，发现ladder都没问题，郁闷啊，求各位大侠给看看怎么回事啊！！！

12.18.JPG
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不将就
1楼 2012-12-19 11:22:21
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-19 11:55:16
MARKER有部分也歪了

产物没有问题，应该是你电泳条件不好。1，缓冲液没有把胶掩盖住；2，电极丝歪了；3，胶配的不好，冷却过头了
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3楼2012-12-19 11:35:20
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忘忧草_

木虫 (正式写手)
顶！！！！！！！！！！！1
2楼2012-12-19 11:24:00
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忘忧草_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2012-12-19 11:35:20
MARKER有部分也歪了

产物没有问题，应该是你电泳条件不好。1，缓冲液没有把胶掩盖住；2，电极丝歪了；3，胶配的不好，冷却过头了

缓冲液都盖住了
电极丝不确定 我试了个电泳槽 也出现类似的情况 但是如果只跑pcr产物就没事 难道是酶切体系里面的一些物质在跑电泳时和胶发生了反应
而且这个图也只有酶切部分有问题 ladder都没问题啊
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不将就
4楼2012-12-19 11:57:37
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望海思月

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-19 18:52:15
应该是制胶的问题，胶不均匀就会出现这种现象的
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5楼2012-12-19 16:23:52
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