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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物酶切后电泳跑成这样 费解啊！！！
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-20 10:33:46
引用回帖:
10楼: Originally posted by 忘忧草_ at 2012-12-19 18:56:21
我也猜测是不是酶切体系的问题 体系里面有什么让胶在电泳时发生了变化 我的酶切体系是
pcr产物5 ul
酶       1 ul
buffer  1 ul
水       3 ul...

酶切肯定不會有問題吧，重做吧，應該不會再出現了~如果還這樣聚換酶或者buffer試試
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我会绕一个圈，走回到实验室
11楼2012-12-20 09:57:33
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virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-20 13:13:41
胶的问题，胶凝固的时候不太均匀。
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virus
12楼2012-12-20 11:24:23
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
忘忧草_: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-20 13:13:57
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:00:35
一定是胶或者电泳条件的问题，一定与酶切产物没有关系，明显看到产物左右两边的也是弧线的了。重新做块胶，换个电泳槽就行了
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总有一天我要修改用户名。
13楼2012-12-20 12:33:53
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三撇五撇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-23 12:44:24
明显是胶的问题啊
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14楼2012-12-22 12:52:00
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Eva2009

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

忘忧草_
15楼2012-12-22 15:41:11
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zhoufeng1982

木虫 (著名写手)
知道了啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊
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16楼2012-12-22 16:35:16
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alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-23 12:45:46
不会是你的酶切有问题的，还是觉得你可以缩短一下跑胶时间，隔时间观察下。样品放在两边的Lane
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修身、齐家、治国、平天下
17楼2012-12-23 09:25:45
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忘忧草_

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by Eva2009 at 2012-12-22 15:41:11
酶切产物电泳经常会出现的情况，受离子含量的影响，导致电泳条带弯曲

那这样的情况怎么克服后者避免呢？
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不将就
18楼2012-12-23 12:45:14
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xj0311

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-24 08:48:14
酶的量可以少加一点，也可能是胶的浓度不均一
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19楼2012-12-23 17:45:47
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xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
忘忧草_: 金币+2, ★有帮助 2012-12-24 15:45:13
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:00:51
感觉应该是配胶的时候没有等琼脂糖溶解完全就冷却了，导致胶各部分浓度不一，才出现这种情况。要么就是电压不稳造成的，但第一种可能性比较大。
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20楼2012-12-24 10:48:59
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