应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR和回收条带的问题
51/1返回列表
查看: 1687  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR和回收条带的问题

从cDNA里扩一个150b的片段，用聚丙烯电泳出了在150b左右的三条带，条带深浅基本一致，这三条带相差大概二三十b。现在有两个想法，不知道哪个好些
1跑高浓度的琼脂糖，分出这三条带，切胶测序
2跑聚丙烯酰胺，切条带回收，再PCR，分别测序
如果第一种的话，跑多少浓度的？
第二种的话，如何回收聚丙烯酰胺的条带啊，煮沸法没有回收成功啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-01 16:17:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的是200多bp的，用的琼脂糖凝胶电泳，浓度时3%。然后胶回收，结果还可以。希望对你有帮助
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-19 10:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 不错啊 2011-08-01 20:32:45
高浓度琼脂糖操作上不好弄，浓度高了后胶做不好，容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点，你看看相关的回收试剂盒，也不是很贵
赞一下(1人) 回复此楼
以马内利！
2楼2011-08-01 18:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc1027

木虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-02 09:58:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by bear0329 at 2011-08-01 18:07:23:
高浓度琼脂糖操作上不好弄，浓度高了后胶做不好，容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点，你看看相关的回收试剂盒，也不是很贵

我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后，直接吸取上清液做PCR的，这样也可以，根本没用到回收试剂盒？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-08-02 09:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24:
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后，直接吸取上清液做PCR的，这样也可以，根本没用到回收试剂盒？

这个溶解的时候胶吸水胀大了……，没有上清液了……加多点水做pcr就没条带了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-02 12:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-02 12:25 by n0P4fnsXKbBK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-02 12:20 by n0P4fnsXKbBK
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 BCdvBAEpt3zm 2026-11-01 4/200 2026-11-02 10:23 by dcc2yOIRGGTT
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 YXM1FDCSE8Bn 2026-10-31 6/300 2026-11-02 09:36 by dcc2yOIRGGTT
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-02 09:29 by dcc2yOIRGGTT
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +3 iaeyuan 2026-11-01 3/150 2026-11-02 07:49 by kudofaye
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-02 06:29 by xzcv0Tehd8lQ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-02 06:13 by xzcv0Tehd8lQ
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-02 06:07 by xzcv0Tehd8lQ
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 13/650 2026-11-02 06:03 by xzcv0Tehd8lQ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 21/1050 2026-11-02 05:41 by xzcv0Tehd8lQ
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-02 02:47 by xzcv0Tehd8lQ
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-01 22:27 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 22:11 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 21:45 by xzcv0Tehd8lQ
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-01 20:03 by xzcv0Tehd8lQ
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 19:50 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 16:48 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 22/1100 2026-11-01 16:35 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 17/850 2026-11-01 12:24 by BCdvBAEpt3zm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭