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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？ 已有7人参与

十月中旬的样子做的PCR，凝胶电泳检测之后，条带是单一的大概在1000左右，是需要的目的条带，如图1。
      由于中间带本科生实验，耽误了些时间，一直将PCR产物放置-20℃保存。
      昨天将之前保存的PCR产物拿出来重新进行检测，发现目的条带只有400了，如图2，左一和左二，都是1500的marker。
      图二的 左三到左七都是用与之前做PCR同样的体系，同样的引物，同样的模板进行PCR的，结果条带也只有400.
      弄得我现在一头雾水，都不知道是啥原因，求各位帮忙解答一下。

PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？
图2.jpg


PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？-1
图1.jpg
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2014-10-29 11:42:25
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

去哪里看海

铁虫 (小有名气)
见过质粒变小的，没见过片段变小的，同求
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2楼2014-10-29 11:48:05
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yuyxwr

新虫 (初入文坛)
应该是形成了超螺旋结构，所以移动速率加快了。重新变性、复性。
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7楼2014-10-29 21:52:26
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Ethanxia

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-30 19:18:21
一方面考虑降解，另一方面考虑超级结构。尝试一下55度孵育15分钟再点样跑胶。
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知不足而常思进
10楼2014-10-30 11:58:36
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普通回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-30 11:29:51
会被降解，我们这里这测过浓度，会有所降低，但没有跑过胶，总感觉你的片段减少的太多了···
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···
3楼2014-10-29 13:11:28
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-29 13:11:28
会被降解，我们这里这测过浓度，会有所降低，但没有跑过胶，总感觉你的片段减少的太多了···

换个marker试了一下，发现条带又在700左右，真是要疯了
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
4楼2014-10-29 17:22:19
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by wu-ke-da at 2014-10-29 17:22:19
换个marker试了一下，发现条带又在700左右，真是要疯了...

要不然你直接往下做吧··
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···
5楼2014-10-29 21:17:04
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-29 21:17:04
要不然你直接往下做吧··...

这都可以，，，，，
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
6楼2014-10-29 21:39:04
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latchkeyboy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-30 11:29:56
会不会被降解了啊，虽然我没有碰到过，但是我总觉得-20度的冰箱开关比较频繁，万一有人在里面找个东西，花了一些时间，而且pcr产物量又比较少，很容易就溶解了。后来我就把提的东西都放在-80度保存了。以防万一了。
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笨鸟先飞&早起的鸟儿有虫吃！
8楼2014-10-30 09:14:21
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by wu-ke-da at 2014-10-29 21:39:04
这都可以，，，，，...

恩，不能总跑电泳吧···
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···
9楼2014-10-30 11:50:06
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