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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR产物放置-20℃一段时间后,条带发生改变的原因? 已有7人参与

十月中旬的样子做的PCR,凝胶电泳检测之后,条带是单一的大概在1000左右,是需要的目的条带,如图1。
      由于中间带本科生实验,耽误了些时间,一直将PCR产物放置-20℃保存。
      昨天将之前保存的PCR产物拿出来重新进行检测,发现目的条带只有400了,如图2,左一和左二,都是1500的marker。
      图二的 左三到左七都是用与之前做PCR同样的体系,同样的引物,同样的模板进行PCR的,结果条带也只有400.
      弄得我现在一头雾水,都不知道是啥原因,求各位帮忙解答一下。

PCR产物放置-20℃一段时间后,条带发生改变的原因?
图2.jpg


PCR产物放置-20℃一段时间后,条带发生改变的原因?-1
图1.jpg
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喜欢生物,所以想好好研究下去!
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Ethanxia

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-30 19:18:21
一方面考虑降解,另一方面考虑超级结构。尝试一下55度孵育15分钟再点样跑胶。
知不足而常思进
10楼2014-10-30 11:58:36
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

见过质粒变小的,没见过片段变小的,同求
2楼2014-10-29 11:48:05
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-30 11:29:51
会被降解,我们这里这测过浓度,会有所降低,但没有跑过胶,总感觉你的片段减少的太多了···
···
3楼2014-10-29 13:11:28
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-29 13:11:28
会被降解,我们这里这测过浓度,会有所降低,但没有跑过胶,总感觉你的片段减少的太多了···

换个marker试了一下,发现条带又在700左右,真是要疯了
喜欢生物,所以想好好研究下去!
4楼2014-10-29 17:22:19
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