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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR和回收条带的问题
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我和我自己

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR和回收条带的问题

从cDNA里扩一个150b的片段，用聚丙烯电泳出了在150b左右的三条带，条带深浅基本一致，这三条带相差大概二三十b。现在有两个想法，不知道哪个好些
1跑高浓度的琼脂糖，分出这三条带，切胶测序
2跑聚丙烯酰胺，切条带回收，再PCR，分别测序
如果第一种的话，跑多少浓度的？
第二种的话，如何回收聚丙烯酰胺的条带啊，煮沸法没有回收成功啊。
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1楼 2011-08-01 16:17:48
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我和我自己

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24:
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后，直接吸取上清液做PCR的，这样也可以，根本没用到回收试剂盒？

这个溶解的时候胶吸水胀大了……，没有上清液了……加多点水做pcr就没条带了
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4楼2011-09-02 12:51:39
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