24小时热门版块排行榜    

查看: 1291  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR和回收条带的问题

从cDNA里扩一个150b的片段,用聚丙烯电泳出了在150b左右的三条带,条带深浅基本一致,这三条带相差大概二三十b。现在有两个想法,不知道哪个好些
1跑高浓度的琼脂糖,分出这三条带,切胶测序
2跑聚丙烯酰胺,切条带回收,再PCR,分别测序
如果第一种的话,跑多少浓度的?
第二种的话,如何回收聚丙烯酰胺的条带啊,煮沸法没有回收成功啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24:
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后,直接吸取上清液做PCR的,这样也可以,根本没用到回收试剂盒?

这个溶解的时候胶吸水胀大了……,没有上清液了……加多点水做pcr就没条带了
4楼2011-09-02 12:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 不错啊 2011-08-01 20:32:45
高浓度琼脂糖操作上不好弄,浓度高了后胶做不好,容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点,你看看相关的回收试剂盒,也不是很贵
以马内利!
2楼2011-08-01 18:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc1027

木虫 (正式写手)

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-02 09:58:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by bear0329 at 2011-08-01 18:07:23:
高浓度琼脂糖操作上不好弄,浓度高了后胶做不好,容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点,你看看相关的回收试剂盒,也不是很贵

我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后,直接吸取上清液做PCR的,这样也可以,根本没用到回收试剂盒?
3楼2011-08-02 09:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
849109楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后,直接吸取上清液做PCR的,这样也可以,根本没用到回收试剂盒?...

我现在也是这样的情况,水加的少,胶就胀开了,加多了又怕稀释。你的问题解决了没啊?可不可以分享下啊?
5楼2012-08-19 10:03:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:16 by jhhcooi
[考研] 材料专硕找调剂 +4 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 4/200 2026-03-24 17:45 by dick_runner
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +3 我爱学电池 2026-03-23 3/150 2026-03-23 17:16 by AZMK
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap-
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见