24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1321  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR和回收条带的问题

从cDNA里扩一个150b的片段,用聚丙烯电泳出了在150b左右的三条带,条带深浅基本一致,这三条带相差大概二三十b。现在有两个想法,不知道哪个好些
1跑高浓度的琼脂糖,分出这三条带,切胶测序
2跑聚丙烯酰胺,切条带回收,再PCR,分别测序
如果第一种的话,跑多少浓度的?
第二种的话,如何回收聚丙烯酰胺的条带啊,煮沸法没有回收成功啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
849109楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后,直接吸取上清液做PCR的,这样也可以,根本没用到回收试剂盒?...

我现在也是这样的情况,水加的少,胶就胀开了,加多了又怕稀释。你的问题解决了没啊?可不可以分享下啊?
5楼2012-08-19 10:03:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 不错啊 2011-08-01 20:32:45
高浓度琼脂糖操作上不好弄,浓度高了后胶做不好,容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点,你看看相关的回收试剂盒,也不是很贵
以马内利!
2楼2011-08-01 18:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc1027

木虫 (正式写手)

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-02 09:58:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by bear0329 at 2011-08-01 18:07:23:
高浓度琼脂糖操作上不好弄,浓度高了后胶做不好,容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点,你看看相关的回收试剂盒,也不是很贵

我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后,直接吸取上清液做PCR的,这样也可以,根本没用到回收试剂盒?
3楼2011-08-02 09:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24:
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后,直接吸取上清液做PCR的,这样也可以,根本没用到回收试剂盒?

这个溶解的时候胶吸水胀大了……,没有上清液了……加多点水做pcr就没条带了
4楼2011-09-02 12:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 245求调剂 +3 冰糖橘?汽水 2026-04-13 7/350 2026-04-13 16:42 by 冰糖橘?汽水
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 22专硕求调剂 +6 haoyun上岸 2026-04-11 8/400 2026-04-11 23:21 by labixiaoqiao
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:00 by zhouyuwinner
[考研] 287求调剂 +6 Fnhc 2026-04-07 6/300 2026-04-08 10:05 by xingguangj
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见