应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR和回收条带的问题
61/1返回列表
查看: 1281  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

我和我自己

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR和回收条带的问题

从cDNA里扩一个150b的片段，用聚丙烯电泳出了在150b左右的三条带，条带深浅基本一致，这三条带相差大概二三十b。现在有两个想法，不知道哪个好些
1跑高浓度的琼脂糖，分出这三条带，切胶测序
2跑聚丙烯酰胺，切条带回收，再PCR，分别测序
如果第一种的话，跑多少浓度的？
第二种的话，如何回收聚丙烯酰胺的条带啊，煮沸法没有回收成功啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-01 16:17:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 不错啊 2011-08-01 20:32:45
高浓度琼脂糖操作上不好弄，浓度高了后胶做不好，容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点，你看看相关的回收试剂盒，也不是很贵
赞一下(1人) 回复此楼
以马内利！
2楼2011-08-01 18:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc1027

木虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-02 09:58:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by bear0329 at 2011-08-01 18:07:23:
高浓度琼脂糖操作上不好弄，浓度高了后胶做不好，容易有气泡。
聚丙烯酰胺凝胶回收靠谱点，你看看相关的回收试剂盒，也不是很贵

我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后，直接吸取上清液做PCR的，这样也可以，根本没用到回收试剂盒？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-08-02 09:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24:
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后，直接吸取上清液做PCR的，这样也可以，根本没用到回收试剂盒？

这个溶解的时候胶吸水胀大了……，没有上清液了……加多点水做pcr就没条带了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-02 12:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojo

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
849109楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-02 09:28:24
我以前看到别人论文中DGGE胶直接切下来溶解后，直接吸取上清液做PCR的，这样也可以，根本没用到回收试剂盒？...

我现在也是这样的情况，水加的少，胶就胀开了，加多了又怕稀释。你的问题解决了没啊？可不可以分享下啊？
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-19 10:03:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的是200多bp的，用的琼脂糖凝胶电泳，浓度时3%。然后胶回收，结果还可以。希望对你有帮助
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-19 10:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我和我自己 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +12 吃吃吃才有意义 2026-03-19 13/650 2026-03-24 10:06 by NCUT_Yu
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +4 pk3725069 2026-03-19 16/800 2026-03-23 23:09 by 汪！？！
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +4 cccchenso 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:00 by 徐ckkk
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-22 5/250 2026-03-23 22:01 by fuyu_
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭